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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>進(jìn)口elisa試劑盒>>大鼠elisa試劑盒>> 48T/96T大鼠泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)elisa試劑盒
大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat E2/ubiquitin-conjugating enzyme,E2/UBCE ELISA Kit |
貨號(hào) | GOY-R74319 |
實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時(shí);
3. 吸棄,加檢測(cè)溶液A100µL,37°C孵育1小時(shí);
4. 洗板3次;
5. 加檢測(cè)溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測(cè)。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測(cè)。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測(cè),應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測(cè)吸光值。
大鼠泛素結(jié)合酶(E2/UBCE)elisa試劑盒操作步驟:
1)運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2)依據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測(cè)樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動(dòng)30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動(dòng)混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測(cè)定成果。
9)在450nm波利益測(cè)定各孔的OD值。
巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP1β)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 釀酒酵母 5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 尖孢鐮孢 1g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 平菇 5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP3α)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 密歇根棍狀桿菌標(biāo)記亞種 1g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP3β)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 戊糖片球菌 25g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP3β)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% Priceomyces sp. 5g
巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP3β)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 97% 阿姆斯特丹曲霉 1g
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 枯草芽孢桿菌枯草亞種 1g
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 大腸埃希氏菌 25g
基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 黑曲霉 5g
基質(zhì)金屬蛋白酶10(MMP10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 谷氨酸棒桿菌 100g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% *百脈根根瘤菌 25g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) ≥98% 托素湖萊茵海默氏菌 5g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 黑曲霉 1g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 側(cè)孢短芽孢桿菌 5g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 長枝木霉 5g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 棱柱散尾菌 100g
間隙連接蛋白43(CX43)(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 98% 枯草芽胞桿菌 25g
SDS蛋白酶DNA萃取 ACY1(aminoacylase-1) 100 ul
異丙醇沉淀法DNA萃取 SAT1(Diamine acetyltransferase 1) 100 ul
快速鹽析法DNA萃取 SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) 100 ul
二(DPA)DNA比色法定量測(cè)定 IFNA2(Inteferon alpha 2a) 100 ul
二氨基甲酸(DABA)DNA比色法定量測(cè)定 NENF(Neudesin) 20 ul
鋱鹽(terbiumIII)單鏈DNA熒光定量測(cè)定 SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) 100 ul
PICO GREEN雙鏈DNA熒光定量測(cè)定 beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) 100 ul
λDNA (HINDIII)標(biāo)準(zhǔn)樣(100至2000堿基) Wnt6(Protein Wnt-6) 100 ul
一步法膠回收 NEXN(Nexilin) 100 ul
高質(zhì)純化膠回收 ICAM 5(Intercellular Adhesion Molecule 5) 100 ul
聚酰胺凝膠粉碎法膠回收 Spexin 20 ul
高質(zhì)純化聚酰胺凝膠粉碎法膠回收 UNC5B(Netrin Receptor UNC5B) 100 ul
初級(jí)離心柱DNA回收 IRS1(Insulin Receptor SubstRate 1) 100 ul
高級(jí)離心柱DNA回收 CXCR2(C-X-C chemokine receptor type 2) 20 ul
聚二醇沉淀法DNA清潔 CEBPZ(CCAAT/enhancer binding protein zeta) 100 ul
酶解法PCR清潔 PAP(Plasmin-Antiplasmin Complex) 100 ul
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