實(shí)驗(yàn)流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備；
2. 加樣（標(biāo)準(zhǔn)品及樣本）100µL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100µL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100µL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50µL，立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研，發(fā)靈敏性高，高效性，*抗體，吸附均勻、吸附性好，回收利用率高、可靠性強(qiáng)，無效包退包換，公司提供免費(fèi)代測服務(wù)，各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全，質(zhì)量可靠。

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樣品收集、處理及保存：
1）.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2）細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3）血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4）血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5）體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.）組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序：
1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
真菌/酵母堿性焦磷酸酶（Alkaline Pyrophosphatase）活性比色法定量　MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) 　20 ul

植物堿性焦磷酸酶（Alkaline Pyrophosphatase）活性比色法法定量　MS4A1(B-lymphocyte antigen CD20) 　100 ul

通用型細(xì)胞對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量　MPST (3-mercaptopyruvate sulfurtransferase) 　100 ul

通用型組織對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量　ADAM17(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17) 　100 ul

通用型血液對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性比色法定量　MREG (Melanoregulin) 　100 ul

通用型細(xì)胞對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性熒光定量　MADD (MAP kinase-activating death domain protein) 　100 ul

通用型組織對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性熒光定量　MAS1 (Proto-oncogene Mas) 　100 ul

通用型血液對氧磷酶1（PON1）有機(jī)磷酸酶活性熒光定量　MAMLD1 (Mastermind-like domain-containing protein 1) 　100 ul

細(xì)胞對氧磷酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量　MMP15(Matrix metalloproteinase-15) 　100 ul

組織對氧磷酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量　MCF2L (Guanine nucleotide exchange factor DBS) 　100 ul

血液對氧磷酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量　RPIA(Ribose-5-phosphate isomerase) 　100 ul

組織對氧磷酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量　MXI1 (Max-interacting protein 1) 　100 ul

血液對氧磷酶1（PON1）內(nèi)酯酶活性比色法定量　MTCP1 (Protein p13 MTCP-1) 　100 ul

細(xì)胞對氧磷酶2（PON2）活性比色法定量　MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) 　100 ul

組織對氧磷酶2（PON2）活性比色法定量　ACADM (Medium-chain specific acyl-CoA dehydrogenase, mitochondrial) 　100µl

細(xì)胞對氧磷酶3（PON3）活性比色法定量　MKKS (McKusick-Kaufman/Bardet-Biedl syndromes putative chaperonin) 　100 ul
TRAIL-R3 elisa試劑盒說明書free fatty acids游離脂肪酸種屬: Leccinum│versipelle (Fr. & Hök) Snell異色疣柄牛肝菌

inducible nitric oxide synthase誘導(dǎo)型NO合酶種屬: Gyroporus│castaneus (Bull.) Quél.褐園孢牛肝菌

Protamine魚精蛋白種屬: Crebrothecium│ashbyii阿舒多囊酵母

Irisin鳶尾素種屬: Monascus│sanguineus血紅紅曲

Pokemo原癌基因pokemo種屬: Cordyceps│sp.蟲草屬

Protocadherin-18原鈣粘蛋白18種屬: Cantharellus│cibarius Fr.#雞油菌

Pregnanediol孕二醇種屬: Apiospora│montagnei Sacc.蒙塔涅梨孢假殼

progesterone induced blocking factor孕激素誘導(dǎo)阻斷因子種屬: Theileria│sinensis中華泰勒蟲（甘肅臨洮株-2）

Progesterone孕酮種屬: Yersinia│intermedia中間型耶爾森菌

progesterone receptor孕酮受體種屬: Monotospora│sp.單頭孢霉屬

apoprotein A1載脂蛋白A1種屬: Agrocybe│cylindracea (DC.) Gillet茶新菇AC-5

apoprotein A2載脂蛋白A2種屬: Ganodermaapplanatum(Pers.exWullr)Pat.平蓋靈芝（樹舌）

apoprotein A4載脂蛋白A4種屬: Phyllosticta│sorghina Sacc.高粱葉點(diǎn)菌

apoprotein B100載脂蛋白B100種屬: 2μgpBARGPE1質(zhì)粒

apoprotein B48載脂蛋白B48種屬: Cedecea│sp.地西菌
操作步驟：
1）運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動混勻，37℃溫育1小時。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。