當前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>生化檢測試劑盒>>糖代謝系列>> αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)微量法
貨號 | GOY-01S6777 |
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測定步驟:
1、 酶標儀預熱30min以上,調(diào)節(jié)波長至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測定樣本較少,可按照實際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
100管/48樣 | 微量法 | GOY-01S6777 |
商品介紹
測定意義 α-L-Af 是一種能夠水解非還原呋喃阿拉伯糖殘基的糖苷酶類,使細胞壁阿拉伯半乳聚糖、阿拉伯甘露聚糖等中性糖不斷解離,促進果膠的增溶和降解。由于果實成熟過程中常常伴隨著阿拉伯糖的喪失,該酶活性在果實成熟軟化中的研究具有重大意義。 測定原理: α-L-Af分解對硝基酚阿拉伯呋喃糖苷生成對-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-L-Af活性。 自備用品: 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
② 細菌/細胞樣本:
先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。
【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間 30min可以延長到 40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測,通??梢允箿y定正常。
錳,一水 ACS, 98.0-102.0%碲標準溶液 100μg/ml,基體:HCIsRANKL(Mouse soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand)ELISA Kit 小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基
錳,一水 for plant cell culture , for cell culture,99%1000µg/mL,基體:10%HClCT(Mouse Calcitonin)ELISA Kit 小鼠降鈣素
硝酸錳溶液 AR,50 wt. % in H2O銩標準溶液 1000μg/mL,基體:10%HCLET-1(Mouse Endothelin 1)ELISA Kit 小鼠內(nèi)皮素1
硝酸錳溶液 CP,50 wt. % in H2O1,2,5-三氯苯標準溶液0.099mg/ml,溶劑:異辛烷E2(Mouse Estradiol)ELISA Kit 小鼠雌二
四水 ACS總堿度溶液標準物質(zhì) 1000μg/mL,基體:水Cortisol(Mouse Cortisol)ELISA Kit 小鼠皮質(zhì)
試劑汞 AR,99.999% metals basis三氯:5.00mg/L,四氯化碳:0.20mg/L,基體:甲TSH(Mouse Thyroid Stimulating Hormone)ELISA Kit 小鼠促甲狀腺素
試劑汞 ACS,99.9995% metals basis氬-氬法地質(zhì)年齡標準物質(zhì)(角閃石) 基體:角閃石Methylase(Mouse Methylase)ELISA Kit 小鼠甲基化
水質(zhì)汞標樣 濃度范圍:6.14±0.42(ug/L),分析標準品 尿素氮溶液標準物質(zhì) 尿素氮:1000.4 mg/LPCNA(Mouse proliferating cell nuclear antigen antibody)ELISA Kit 小鼠抗增殖核抗原抗體
αL阿拉伯呋喃糖苷酶(αLAf)微量法Ⅲ型前膠原C端肽(PⅢCP)免疫試劑盒進口、分裝
β-黑色素細胞刺激素(β-MSH)免疫試劑盒進口、分裝
牛β羥基丁酸脫氫(β-HBDH)免疫試劑盒進口、組裝
蛋白ATP1B4(ATP1B4)免疫試劑盒進口、組裝
可溶性CD44變體9(sCD44-v9)免疫試劑盒進口、組裝
前膠原C內(nèi)肽增強子1(PCOLCE1)免疫試劑盒進口、分裝
胎盤生長因子(PLGF)免疫試劑盒進口、分裝
兔子白介素6(IL-6)免疫試劑盒進口、分裝
β-淀粉樣前體蛋白(β-APP)免疫試劑盒進口、組裝
小鼠CC趨化因子受體6(CCR-6)免疫試劑盒進口、組裝
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