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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 植物硝態(tài)氮微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6496 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/96樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6496 |
商品介紹:
測(cè)定意義
硝態(tài)氮是植物最主要的氮源。植物體內(nèi)硝態(tài)氮含量反映了土壤中硝態(tài)氮的供應(yīng)情況,可作為土壤氮肥的指標(biāo)。測(cè)定植物體內(nèi)的硝態(tài)氮含量,不僅能夠反映出植物的氮素營(yíng)養(yǎng)情況,而且對(duì)鑒定蔬菜和以植物為原料的加工制品的品質(zhì)也有重要的意義。
測(cè)定原理
在濃酸條件下,NO3-與水楊酸反應(yīng),生成硝基水楊酸,硝基水楊酸在堿性條件下(PH>12)呈黃色,在一定范圍內(nèi),其顏色深淺與含量成正比,可比色測(cè)定計(jì)算得硝態(tài)氮含量。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
蒸餾水、天平、常溫離心機(jī)、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
硒基酸 99%2-溴-4-氟甲苯 98%ASD(Human Androstenedione) ELISA Kit 人雄烯二酮
1-芘丁酸 99%2-溴-5-氟甲苯 98%E3(Human Estriol) ELISA Kit 人雌三
吡 無水級(jí)2-溴-6-氟甲苯 98%17-OHP(Human 17-Hydroxyprogesterone) ELISA Kit 人17羥孕酮
晶體, ≥99%3-溴-2-氟甲苯 98%Human Tri-iodothyronine ELISA Kit 人狀腺原
五氟酸酐 AR,98.0%3-溴-4-氟甲苯 99%Human thyroxineT4 ELISA Kit 人甲狀腺素
喹啉黃 95%4-溴-2-氟甲苯 99%FT4(Human Free Thyroxine) ELISA Kit 人游離甲狀腺素
喹哪紅 AR4-溴-3-氟甲苯 98%Free-T3(Human Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 人游離狀腺原
羅丹明110 激光級(jí)5-溴-2-氟甲苯 98%NN-T4(Human Neonatal Thyroxine) ELISA Kit 人新生甲狀腺素
植物硝態(tài)氮微量法檢測(cè)試劑盒2,4-二酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體CD44v7 CD44V7抗體
葡萄糖鈣 99%腦低密度脂蛋白受體蛋白1抗體CD44v6 CD44V6抗體
葡萄糖鈣 USP級(jí)軸突蛋白2抗體CD44v5 CD44V5抗體
D-葡萄糖鈉 AR,99.0%腎小球粘附分子受體抗體CD44v4 CD44V4抗體
D-葡萄糖鈉 藥用級(jí)神經(jīng)生長(zhǎng)調(diào)節(jié)蛋白1抗體CD44v10 CD44V10抗體
D-葡萄糖溶液,49-53 wt. % in H2O軸突生長(zhǎng)誘向因子G2抗體CD44/HCAM/PGP1 CD44抗體
葡萄糖亞鐵 USP級(jí)黑色素瘤硫軟骨素蛋白多糖4抗體CD44/HCAM/PGP1 CD44抗體
葡萄糖亞鐵 98%,試劑級(jí)NDST1蛋白抗體CD43/SPN CD43抗體
葡萄糖鎂 USP級(jí)EGR1結(jié)合蛋白2抗體CD40L CD40L抗體
葡萄糖 AR硝化α-突觸核蛋白CD40/TNFRSF5 腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體
葡萄糖 藥用級(jí),USPNK2轉(zhuǎn)錄樣蛋白B抗體CD4 CD4抗體
葡萄糖鋅 98%神經(jīng)正五聚體1抗體CD4 CD4抗體
中性氧化鋁 100-200目核孔蛋白NUP160抗體CD4 CD4抗體
堿性氧化鋁 100-200目核分離因C蛋白抗體CD38 CD38抗體
性氧化鋁 100-200目化核分離因C蛋白抗體CD38 CD38抗體
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