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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

液體硫乙酸鹽培養(yǎng)基 BRL-甲硫 99%AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit  人抗麥膠蛋白/麥溶蛋白抗體

硫乙酸鹽液體培養(yǎng)基（藥典） BRL-甲硫 非動物源，EP, JP, USP, 用于培養(yǎng), 99.0-101.0%APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit  人抗磷脂?？贵w

Fraser 肉湯增菌液基礎(chǔ) BRL-脯 99%TA(Human anti-teichoic acid antibody) ELISA Kit  人抗磷壁酸抗體

改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基 BRL- 99%ALA/LCA(Human anti-lymphocytotoxic antibody) ELISA Kit  人抗抗體

四硫磺酸鈉亮綠增菌液基礎(chǔ) BRL- 99%Human anti-macrophage antibody ELISA Kit  人抗巨噬抗體

戊二(50%) 高純度醫(yī)用級,50% in H2OL- 99%TPO-Ab(Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody) ELISA Kit  人抗甲狀腺過氧化物抗體

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 BR非動物源，EP, JP, USP ；用于培養(yǎng)，99.0-101.0%RBC(Human anti-red cell antibody) ELISA Kit  人抗紅抗體

GN增菌液 BR非動物源，EP, JP, USP ；用于培養(yǎng)，99.0 - 101.0 %28S rRNP(Human 28S ribosome RNP antibody) ELISA Kit  人28S抗核糖體抗體

豕鏈球菌硝鐿 99.99% metals basis山羊促生長激素釋放激素(GHRH)免疫試劑盒胰羧肽A1抗體Rabbit Anti-human IgM/HRP  辣根過氧化物標記的兔抗人IgM

羅丹明6G 高純級，95%山羊促皮質(zhì)激素釋放因子(CRF)免疫試劑盒羧肽A2抗體Rabbit Anti-human IgM/Gold  膠體金標記的兔抗人IgM

安息香 99.5%山羊促皮質(zhì)激素(ACTH)免疫試劑盒腦源性免疫球蛋白超家族蛋白3抗體Rabbit Anti-human IgM/FITC  FITC標記的兔抗人IgM

偶酰 98%山羊促卵泡素(FSH)免疫試劑盒胰羧肽B1抗體Rabbit Anti-human IgM/Cy7  Cy7標記的兔抗人IgM

 Standard for GC，≥99.5%（GC)山羊促狀腺素(TSH)免疫試劑盒維結(jié)合蛋白2抗體Rabbit Anti-human IgM/Cy5.5  Cy5.5標記的兔抗人IgM

 AR,>98.5%(GC)山羊雌激素(E)免疫試劑盒2號染色體開放閱讀框80抗體Rabbit Anti-human IgM/Cy5  Cy5標記的兔抗人IgM

 CP,>98%(GC)山羊雌二(E2)免疫試劑盒化CD32B抗體Rabbit Anti-human IgM/Cy3  Cy3標記的兔抗人IgM

 ACS山羊超氧化物歧化2，線粒體(SOD2)免疫試劑盒過敏素C3（補體C3）抗體Rabbit Anti-human IgM/Bio  標記的兔抗人IgM

 >99.0% (GC)山羊超氧化物歧化1,可溶性(SOD1)免疫試劑盒癌胚抗原相關(guān)粘附分子抗體Rabbit Anti-human IgM/APC  APC標記的兔抗人IgM

 重蒸餾, ≥99.5%山羊超氧化物歧化(SOD)免疫試劑盒質(zhì)多聚腺苷結(jié)合蛋白1抗體Rabbit Anti-human IgM/AP  堿性（AP）標記的兔抗人IgM

DL-苦杏仁 CP,98.5%山羊補體蛋白4(C4)免疫試劑盒半胱氨蛋白抑制劑7抗體Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標記的兔抗人IgM

乙 99%山羊補體蛋白3(C3)免疫試劑盒22號染色體開放閱讀框29抗體Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555標記的兔抗人IgM

 CP，98.0%（劇品）山羊二(MDA)免疫試劑盒神經(jīng)表面蛋白F3Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488標記的兔抗人IgM

藍V AR山羊胞外超氧化物歧化[Cu-Zn](SOD3)免疫試劑盒組織蛋白C抗體Rabbit Anti-human IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgM

喹啉黃 70%山羊白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒半胱蛋白蛋白-4抗體Rabbit anti-human IgM whole serum  兔抗人IgM抗血清

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。