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微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養(yǎng)基。這是由于這些農產品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發(fā)酵罐內發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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產品名稱 | 用途 | 貨號 |
丙酸桿菌 | 僅供科研 | GOY-01J7170
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產菌種不產孢子,如赤霉素產生菌或產孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產酸菌種,則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內,再放入低溫冰箱內進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內,再置于冰箱內進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
聚四 average Mn ~1,0001,2-二乙基苯 Standard for GC,≥99.0% (GC)GATA4 ELISA Kit muman 人GATA結合蛋白4 ELISA試劑盒
分析標準品,≥98%1,5-二羥基萘 98% ACV-RAb(Rat anti-Activin A receptor antibody,ACV-RAb )ELISA Kit 大鼠活化素A受體抗體
3-氯-4-氟苯 99%2,5-二羥基苯甲 97%NGB(Rat Neuroglobin,NGB) ELISA Kit 大鼠腦紅蛋白
3-氯-4-氟苯 分析標準品2,6-二溴苯醌氯亞 99%TPO(Rat Thrombopoietin,TPO )ELISA kit 大鼠血小板生成素
3-乙?;绶?98%2,3-二萘 熒光級,>97% (HPLC)(BAX)Rat Bcl-2 associated X protein,Bax ELISA Kit 大鼠Bcl-2相關X蛋白
3-溴甲苯 98%2,6-二甲氧基苯酸 98%sFAS/Apo-1(Rat soluble Factor-related Apoptosis,sFAS/Apo-1 )ELISA Kit 大鼠可溶性凋亡相關因子
2,2'-聯(lián)苯二羧酸 98%4,5-二苯基咪唑 98%MBP/MBL (Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL) ELISA Kit Rat Mannma binding protein/mannan binding lectin
2-萘乙酸 99%4,5-二氯鄰苯二 98%IL-7(Rat Interleukin-7) ELISA kit 大鼠白介素7
丙酸桿菌苝 98%粘蛋白15抗體CTNNBL1/Beta catenin like 1 β連環(huán)蛋白樣蛋白1抗體
低形燒杯1101 50ml質金屬蛋白22抗體CTNNBIP1 β鏈接素相互作用蛋白1抗體
雙乙鈉 99%肺癌轉移相關蛋白抗體CTNNAL1 粘附分子相關蛋白a1抗體
亞鈉 80%候選腫瘤抑制因MARVELD1抗體CTn1/Troponin I/TNNC1 心肌肌鈣蛋白抗體
1,2,4-三氮唑 99%成熟T淋巴增殖蛋白1抗體CTLA-4/CD152 性T抗原-4抗體
1,2,4-三氮唑 分析標準品絲裂原活化蛋白激8相互作用蛋白1抗體CtIP/RBBP8 視網(wǎng)膜母瘤結合蛋白8抗體
硫釹 SP肌球蛋白輕鏈6抗體CTHRC1 膠原三股螺旋重復蛋白1抗體
硫釹 99.99%化肌增強因子2C抗體CTH/CSE/Cystathionase 胱硫γ裂解抗體
化鐠 99.99% metals basis化黑色素瘤粘附分子CD146抗體CTGFL 結締組織生長因子樣蛋白抗體
化鐠 99.9% metals basis肌增強因子2C抗體CTGF 結締組織生長因子抗體
化鋱,六水 99.9% metals basis促黑激素γ1抗體CTDSPL2 CTDSPL2蛋白抗體
化鋱,六水 99.999% metals basis小鼠抗酮激-M2抗體CTDSPL CTDSPL蛋白抗體
二烷 96%化多聚腺苷結合蛋白抗體CTCF 轉錄阻抑蛋白CTCF抗體
胡椒 CP,99.0%(易制品)有絲分裂原誘導因6抗體CTBP2 C末端結合蛋白2抗體
3'-氨乙酮 97%線粒體融合蛋白Mfn2抗體CTBP1 C端結合蛋白1抗體
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