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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>氮代謝系列>> 尿素氮微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6506 |
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操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | |
規(guī)格 | 100管/48樣 |
檢測(cè)方法 | 微量法 |
貨號(hào) | GOY-01S6506 |
商品介紹:
測(cè)定意義
尿素是生物體內(nèi)含氮化合物分解的終產(chǎn)物,在尿酶催化下分解轉(zhuǎn)化成氨。血液尿素氮是腎功能的主要指標(biāo)之一。
測(cè)定原理
在堿性條件下,尿酶水解尿素產(chǎn)生氨,氨與次氯酸反應(yīng)生成氯胺,再與酚衍生物作用生成綠色吲哚酚,在630nm處有特征吸收峰。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、研缽、常溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制: 市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?/span>0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液樣本的收集: 全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。 1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。 2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA。 |
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
2-甲基-4-異噻唑啉-3-酮 95%丁位十二內(nèi)酯 98%Anti-Cdc6/FITC 熒光素標(biāo)記分裂周期蛋白6抗體IgG
堿 分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%位庚內(nèi)酯 98%Anti-Phospho-cdc25C (Ser216) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化分裂周期蛋白25抗體IgG
堿 98%位庚內(nèi)酯 ≥98%, FCC, KosherAnti-cdc25A /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠分裂周期蛋白25抗體IgG
活性炭 培養(yǎng)級(jí)位庚內(nèi)酯 Standard for GC ,>98.5% (GC)Anti-Phospho-cdc25A (Thr506) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化分裂周期蛋白25抗體IgG
活性炭 植物培養(yǎng)級(jí)椰子 98%Anti-Phospho-cdc25A (Ser76) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化分裂周期蛋白25抗體IgG
茴香 99%椰子 98%, FCC, KosherAnti-Phospho-cdc25A ( Ser178) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠化分裂周期蛋白25抗體IgG
茴香 98%丁位壬內(nèi)酯 98%Anti-Cdc34/FITC 熒光素標(biāo)記周期調(diào)控因子34IgG
茴香 Standard for GC,≥99% (GC)丁位壬內(nèi)酯 98%, FCC, KosherAnti-CDC42/FITC 熒光素標(biāo)記分化周期CDC42蛋白抗體IgG
尿素氮微量法檢測(cè)試劑盒姜黃素 98%整合素α3抗體Fbx15 Fbx15蛋白抗體
姜黃素 分析標(biāo)準(zhǔn)品整合素β5抗體FBRSL1 乙型肝炎病X蛋白反轉(zhuǎn)錄蛋白9抗體
班蝥素 98%整合素α1抗體FBP2 肌肉果糖二抗體
班蝥素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%白介素2受體β鏈抗體 IL-2RβFBP1 果糖1,6-二酯抗體
輔Q10 98%干擾素α2b抗體FBN1 原纖維蛋白1抗體
97%誘導(dǎo)協(xié)同激分子配體CD275抗體fatty acid elongase 脂肪延長(zhǎng)抗體
葉綠素b 95%雞傳染性法氏囊病病抗體FAT/CDHF7/FAT1 鈣粘蛋白家族成員7抗體
隱綠原 分析標(biāo)準(zhǔn)品白介素-17抗體FASTKD5 Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體
洋薊素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%5'脫氫2抗體FASTKD2 Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體
大黃酚 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%即刻早期應(yīng)答因5樣蛋白抗體FASTKD1 Fas活化激結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體
大黃酚 97%整合素αV抗體Fast skeletal Myosin/MRLC2 骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體
去斑蝥素 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%白介素-19抗體FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨激抗體
0.95白介素3抗體FASP1/C21orf45 MaFF相關(guān)蛋白抗體
黃豆苷 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥96%白介素3受體a鏈抗體FASN/Fatty Acid Synthase 1 脂肪合成抗體
黃豆苷 95%白介素-5受體α鏈抗體IL-5RαFasL/CD178 兔抗FasL抗體。
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