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公司采用的全是進口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務,各種種屬ELISA試劑盒產品齊全,質量可靠。
產品名稱 | 大鼠雌酮(E1)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat estrone,E1 ELISA kit |
貨號 | GOY-R74387 |
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備;
2. 加樣(標準品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數。
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樣品收集、處理及保存:
1).細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104-106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在450 nm處測吸光值。
大鼠雌酮(E1)elisa試劑盒操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據待測樣品數量加上規(guī)范品的數量決議所需的板條數。每個規(guī)范品和空白孔主張做復孔。每個樣品依據自個的數量來定,能運用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內。當即參加50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應當即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
血管舒張劑激活磷蛋白(VASP)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 厚垣鐮孢菌 5g
神經疾病靶標酯酶(NTE)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 灰紅鏈霉菌 100mg
整合素αV(ITGαV)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 皮氏羅爾斯通氏菌 1g
基質重塑關聯蛋白5(MXRA5)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 短小芽孢桿菌 250mg
斯鈣素1(STC1)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 固氮菌 1g
Klotho蛋白(KL)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 蠟狀芽孢桿菌 5g
層黏連蛋白受體1(LAMR1)(酶聯免疫吸附試驗法) 90% 環(huán)棱褐孔菌 100g
心營養(yǎng)素樣細胞因子1(CLCF1)(酶聯免疫吸附試驗法) 90% 殼菌 25g
細胞骨架活性調節(jié)蛋白(ARC)(酶聯免疫吸附試驗法) 90% 谷氨酸棒桿菌 5g
生長分化因子3(GDF3)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 活潑微球菌 1g
生長分化因子3(GDF3)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 翹鱗香菇 25g
多巴胺轉運蛋白(DAT)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 鏈格孢 5g
異檸檬酸脫氫酶1(IDH1)(酶聯免疫吸附試驗法) 97% 白腐菌 1g
骨髓基質細胞抗原2(BST2)(酶聯免疫吸附試驗法) 99% 粘絲膜菌 100g
膜鐵轉運蛋白(FPN)(酶聯免疫吸附試驗法) 99% 霍氏格里蒙特氏菌 25g
Ⅳ型膠原α3(COL4α3)(酶聯免疫吸附試驗法) 99% 美澳型核果褐腐病菌 500g
原鈣黏素15(PCDH15)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 好食脈孢菌 100g
銅伴侶超氧化物歧化酶(SOD4)(酶聯免疫吸附試驗法) 98% 動物雙歧桿菌 25g
甲酸化學法石蠟切片抗原修復處理 IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) 100 ul
檸檬酸化學法石蠟切片抗原修復處理 IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) 20 ul
物理法石蠟切片松動組織抗原修復處理 DSG3(Desmoglein-3) 100 ul
胰蛋白酶抗原修復溶液 (NADPH oxidase 1) 100 ul
抗體熒光標記制備(見蛋白/抗體標記專題) LAD1(Ladinin-1) 100 ul
HRP標記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液 ITGA5(Integrin alpha-5) 100 ul
AP標記抗體穩(wěn)定/稀釋溶液 XBP1(X-box-binding protein 1) 20 ul
通用抗體稀釋溶液 DKK2(Dickkopf-related protein 2) 100 ul
HRP生物素穩(wěn)定/稀釋溶液 C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) 20 ul
AP生物素穩(wěn)定/稀釋溶液 CHIA(Acidic mammalian chitinase) 100 ul
熒光生物素穩(wěn)定/稀釋溶液 PDX1(Pancreas/duodenum homeobox protein 1) 100 ul
通用型HRP復合物穩(wěn)定/稀釋溶液 UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) 20 ul
酪胺信號擴增 ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) 100 ul
生物素標記二抗DAB顯色 IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) 100 ul
FITC標記二抗POD轉換 DSG3(Desmoglein-3) 100 ul
超敏型HRP-TMB底物顯色 PRKCE(Protein kinase C epsilon type) 100 ul
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