當(dāng)前位置:上海谷研實業(yè)有限公司>>進(jìn)口elisa試劑盒>>人elisa試劑盒>> 48T/96THIF-1α elisa試劑盒規(guī)格
實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
產(chǎn)品名稱 | HIF-1α elisa試劑盒規(guī)格 |
英文名稱 | HIF-1α elisa Kit |
貨號 | GOY-H7467 |
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樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
黑脛病果膠桿菌GPS1/CSN1 G蛋白通路抑制蛋白1抗體100 ul
屎腸球菌 蘭氏D群Cullin 7 泛素連接酶CUL7蛋白抗體100 ul
犬瘟熱病毒CDCA7 細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白20 ul
Plantibacter flavusASB12 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族12抗體100 ul
嗜二氧雜環(huán)乙烷假諾卡氏菌ASB4 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族4抗體100 ul
大腸埃希氏菌DH5α/pET30a-PknBASB9 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族9抗體100 ul
大腸埃希氏菌DH5a/phA3G-EGFPASB8 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族8抗體100 ul
高溫單孢菌屬phospho-GPS1/CSN1(Ser474) 磷酸化G蛋白通路抑制蛋白1抗體100 ul
假刺孢鏈霉菌ASB7 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族7抗體100 ul
諾卡氏菌屬菌株ASB17 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族17抗體20 ul
曲霉屬ASB5 含錨蛋白重復(fù)序列-細(xì)胞因子信號抑制物盒蛋白家族5抗體100 ul
大腸埃希氏菌DH5α/pET28a-akt1ZSWIM2 E3泛素蛋白連接酶ZSWIM2抗體100 ul
副流感嗜血桿菌ZSWIM3 ZSWIM3蛋白抗體100 ul
蟾蜍分枝桿菌ZNRF1 鋅指/環(huán)指蛋白1抗體100 ul
田鼠分枝桿菌ZNRF2 鋅指/環(huán)指蛋白2抗體100 ul
禽腺病毒(1型)ZNRF3 鋅指蛋白3/環(huán)指蛋白3抗體100 ul
肉毒梭菌 毒素A型ZNRF4 鋅指/環(huán)指蛋白4抗體100 ul
牛棒狀桿菌ZNF230/RNF141 鋅指蛋白230抗體250 ul
HIF-1α elisa試劑盒規(guī)格GNRHR-Ab 檢測試劑盒 促性腺激素釋放激素受體抗體* 規(guī)格: 48T/96T
GnRHR 檢測試劑盒 促性腺激素釋放激素受體* 規(guī)格: 48T/96T
GnRH(Mouse gonadotropin-releasing hormone) 檢測試劑盒 促性腺激素釋放激素* 規(guī)格: 48T/96T
GnRH 檢測試劑盒 促性腺激素釋放激素* 規(guī)格: 48T/96T
GnRH 檢測試劑盒 魚類促性腺激素釋放激素* 規(guī)格: 48T/96T
GMP-140(Mouse alpha-granular membrane protein) 檢測試劑盒 血漿α顆粒膜蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
GMP-140 檢測試劑盒 血漿α顆粒膜蛋白* 規(guī)格: 48T/96T
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
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