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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>淀粉系列>> 可溶性淀粉合成酶(SSS)微量法檢測(cè)試劑盒
貨號(hào) | GOY-01S6685 |
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產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6685 |
商品介紹
測(cè)定意義 SSS(EC 2.4.1.21)通常以游離態(tài)存在于質(zhì)體基質(zhì)中,催化淀粉鏈延長(zhǎng),主要負(fù)責(zé)支鏈淀粉的合成。 測(cè)定原理 SSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP,在反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,NADPH生成量與前一步反應(yīng)中ADP生成量呈正比,340nm下測(cè)定NADPH增加量即可計(jì)算SSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類(lèi)常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。
Candida rugosa白介素23檢測(cè)試劑盒
Yarrowia lipolytica白介素27檢測(cè)試劑盒
Candida rugosa白介素3檢測(cè)試劑盒
Candida rugosa白介素32檢測(cè)試劑盒
Yarrowia lipolytica白介素33檢測(cè)試劑盒
Trichosporon capitatum白介素35檢測(cè)試劑盒
Candida tropicalis白介素38檢測(cè)試劑盒
Candida tropicalis白介素4檢測(cè)試劑盒
可溶性淀粉合成酶(SSS)微量法檢測(cè)試劑盒2,4-二硝標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml,溶劑:Anti-Phospho-FLT3 (Tyr591) 化FMS樣酪氨激3人高鐵血紅蛋白(MHB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,5-二硝標(biāo)準(zhǔn)溶液1.00mg/ml,溶劑:Anti-Phospho-FLT3 (Tyr589/591) 化FMS樣酪氨激3人睪酮受體(TR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,4-二硝 GR,98%Anti-Phospho-FLT3 (Tyr842) 化FMS樣酪氨激3人唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素10(SIGLEC10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,4-二硝 分析標(biāo)準(zhǔn)品,用于環(huán)境分析Anti-Phospho-FLT3 (Tyr969) 化FMS樣酪氨激3人唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素2(SIGLEC2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
2,4-二硝 99%Anti-FN/Fibronectin 1 纖維連接蛋白抗體人肽精氨脫亞氨IV(PADI4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
硝胍 CP,98%Anti-FOS B FosB蛋白抗體人唾液結(jié)合免疫球蛋白樣凝集素8(SIGLEC8)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
硝胍 >99.0%(GC)Anti-FPR1 肽受體1抗體人Smad同源物3 (Smad3/MADH3)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
反式-1,3-二烯 97%Anti-FRA1/FOSL1 FRA-1蛋白抗體人孤腓肽(OFQ/N)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
羥乙叉二膦 60%水溶液Anti-Phospho-FRA1 (Ser265) 化FRA-1蛋白抗體人谷氨半胱氨連接修飾亞(GCLM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
聚烯 平均分子量M.W ~3,000 Anti-FRA2/FOSL2 FRA2/FOSL2抗體人谷氨脫氫(GDH/GLDH)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
聚烯鈉 50% 水溶液Anti-fowl typhoid and pullorum disease 雞白痢、雞傷寒抗體人谷氨脫羧(GAD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
異丁酐 98%Anti-FOXF1 叉頭蛋白F1抗體人谷氨脫羧2(GAD2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
四鄰二酐 98%Anti-FOXJ1/HFH-4 叉頭蛋白J1抗體人谷氨脫羧抗體(GAD-Ab/Anti-GAD)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
乙酰溴 97%Anti-FoxP1 叉頭蛋白P1抗體人S轉(zhuǎn)移(GSTs)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
溴代炔 99%Anti-FOXM1/HFH 11 叉頭蛋白M1抗體人S-轉(zhuǎn)移α1(GSTα1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋?zhuān)簩⒃噭┤谜麴s水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。
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