選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱：sVCAM-1 elisa試劑盒廠家
英文名稱：sVCAM-1 elisa Kit
規(guī)格：48T/96T
保存： 2-8℃（頻繁使用時）；-20℃（長時間不用時）。
有效期： 6 個月(4℃)；12 個月（-20℃）。
用途： 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點：
一、高效、靈敏、特異的抗體；
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體；
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型；
五、性價比非常好，節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標準品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事項：
1加樣：
①實驗樣本過多時，可分批次操作，以減少實驗時間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗時，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準確性，此外，要做到一份樣本一個移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件；
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水??；
3.洗板：
①手工洗板時，拍板時要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次，或適當增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果，酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
細胞皮爾斯（PERLS-DAB）非血紅素鐵（三價）強化染色　PKD2(Polycystin-2) 　100 ul

石蠟切片特恩布爾（TURNBULL-DAB）非血紅素鐵（二價）強化染色　LOXL2(Lysyl oxidase homolog 2) 　100 ul

冰凍切片特恩布爾（TURNBULL-DAB）非血紅素鐵（二價）強化染色　FMOD(Fibromodulin) 　100 ul

細胞特恩布爾（TURNBULL-DAB）非血紅素鐵（二價）強化染色　FAM132B(Protein FAM132B) 　100 ul

血液樣品固著液（Acetic alcohol固著液）　DTNBP1(Dysbindin) 　100 ul

硬組織固著液（Susa 固著液）　ZEB1(Zinc finger E-box-binding homeobox 1) 　100 ul

軟組織固著液（Bouin固著液）　EBLN1(Endogenous Bornavirus-like nucleoprotein 1) 　20 ul

骨組織固著液　SORD(Sorbitol dehydrogenase) 　100 ul

活檢組織固著液　MTOR(Serine/threonine-protein kinase mTOR) 　300 ul

抗原保護固著液（10％中性Formalin 固著液）　IRF3(Interferon regulatory factor 3) 　100 ul

免疫熒光樣品固著液（Michel固著液）　GUCY2C(Heat-stable enterotoxin receptor) 　100 ul

胃腸組織固著液（Hollande固著液）　BPIFA2(BPI fold-containing family A member 2) 　100 ul

前列腺固著液（Hollande固著液）　MST1P9(Putative macrophage-stimulating protein MSTP9) 　20 ul

腎組織固著液（BUBOSCQ-BRAZIL固著液）　UTS2D(Urotensin-2B) 　100 ul

腦組織固著液（Bouin固著液）　HIST1H4A(Histone H4) 　100 ul

腎上腺固著液（Orth固著液）　S100A7(Protein S100-A7) 　100 ul
sVCAM-1 elisa試劑盒廠家Heat Shock 70kDa Protein 12B熱休克70kDa蛋白12B種屬: Gymnopilus│junonius (Fr.) P.D. Orton橙鱗傘1

Heat Shock Protein 10熱休克蛋白10種屬: Cupriavidus numazuensisCupriavidus numazuensis

Heat Shock Protein 47熱休克蛋白47種屬: Streptomyces│vulgaris Waksman#普通鏈霉菌

Heat Shock Protein 60熱休克蛋白60種屬: Tricholoma│sp.口蘑屬

Heat Shock Protein 70熱休克蛋白70種屬: Arthrobotrys│dendroides樹狀節(jié)叢孢

Heat Shock Protein 72熱休克蛋白72種屬: Gaeumannomyces│graminis var. tritici J. Walker小麥全蝕病

Heat Shock Protein 90熱休克蛋白90種屬: Halorubrum│orientale東方鹽紅菌

S139人磷酸化的H2AX抗體種屬: Bacillus│bataviensis巴達維亞芽胞桿菌

Pregnancy Specific β1 Glycoprot特異性β1糖蛋白種屬: Burkholderia glumae水稻細菌性谷枯病菌

pregnancy associated plasma protein A相關(guān)血漿蛋白A種屬: Amycolatopsis│orientalis東方擬無枝菌酸菌

Chorionic Gonadotrophin絨毛膜促性腺激素種屬: Cortinarius│gentilis (Fr.) Fr.尖頂絲膜菌

Chorionic Gonadotrophin β絨毛膜促性腺激素β種屬: Lactobacillus│乳酸菌

Lysozyme溶菌酶種屬: Acrothecium│sp.頂套霉

lysosomal-associated membrane protein 2溶酶體相關(guān)膜蛋白2種屬: Escherichia│coli大腸埃希氏菌DH5α/pMLV

Hemolytic complement溶血補體種屬: Cryptococcus│uzbekistanensis烏茲別克斯坦隱球酵母
操作流程如下：
（1）僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。 
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。