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上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
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淀粉磷酸化酶(SP)微量法檢測(cè)試劑盒

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更新時(shí)間:2022-04-27 11:51:36瀏覽次數(shù):145次

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elisa檢測(cè)試劑盒
ATCC細(xì)胞
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
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PCR檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染
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熒光定量PCR試劑盒
試劑盒
進(jìn)口elisa試劑盒
科研抗體
科研菌種
生化檢測(cè)試劑盒
科研細(xì)胞
貨號(hào) GOY-01S6693
淀粉磷酸化酶(SP)微量法檢測(cè)試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品:IKK gamma/IKBKG KB抑制蛋白激γ抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-CaMK2 alpha (Tyr231) 磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2α抗體 規(guī)格: 0.1ml
GABRA3/GABA A Receptor alpha 3 G氨基丁酸受體α3抗體 規(guī)格: 0.2mlNIS 鈉轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

商品介紹

測(cè)定意義

淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。

在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長(zhǎng)淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過程中的關(guān)鍵酶。

在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無(wú)機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測(cè)定意義。

測(cè)定原理:

淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無(wú)機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。

【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

淀粉磷酸化酶(SP)微量法檢測(cè)試劑盒

100管/96樣

微量法

GOY-01S6693


QQ截圖20220307153443.png

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

① 組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取

② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;

2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般

將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。

測(cè)定步驟:

1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。

2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。

3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)

4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。

5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。

神經(jīng)氯離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體Human POU2AF1 ELISA Kit

原癌基因K-ras抗體Human COX4I1(Cytochrome c oxidase subunit 4 isoform 1, mitochondrial) ELISA Kit干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體流式組化

腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因抗體Human POU3F3 ELISA Kit代謝型谷受體2

血藍(lán)蛋白抗體Human POLR3A ELISA Kit基質(zhì)金屬蛋白-2抗體流式組化

心臟離子通道蛋白亞基2抗體Human COX5A(Cytochrome c oxidase subunit 5A, mitochondrial) ELISA Kit陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-3抗體流式組化

KLHDC8A蛋白抗體Human POLR2J2 ELISA Kit腺苷酸環(huán)化激活肽-38抗體流式組化

角質(zhì)素抗體Human POLR2L ELISA KitL-谷二甲酯鹽酸鹽

腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13Human POU2AF1 ELISA KitL-苯甘甲酯鹽酸鹽

淀粉磷酸化酶(SP)微量法檢測(cè)試劑盒肉瘤抗原1(SAGE1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

基質(zhì)金屬蛋白13(MMP-13)免疫試劑盒*直銷

抗甘氨酰tRNA合成(GARS)抗體免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)免疫試劑盒*直銷

抗核周因子(APF)抗體免疫試劑盒*直銷

磷脂轉(zhuǎn)移蛋白β(PITPNB)免疫試劑盒*直銷

小鼠肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

羥賴(Hyl)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

肌抑素(MSTN)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

多聚腺苷二核糖聚合(PARP)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

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