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選擇ELISA試劑盒應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:大鼠C型鈉尿肽(CNP)elisa試劑盒
英文名稱:Rat C-type natriuretic peptide,CNP ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應(yīng)置于陽光或強光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進行測試。
3,5-二氟苯甲 32085-88-4咖啡酸乙酯乙酰膽堿酯酶(AchE)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
3,5-二氟苯甲 32085-88-4檸檬酸Ⅹ型膠原(COL10)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
4-氟鄰苯二甲酸 320-97-8對二氯苯維生素B1(VB1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
4-氟鄰苯二甲酸 320-97-8鼠李糖硒蛋白P1(SEPP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
4-溴-2-氟-1- 321-23-3檳榔堿硒蛋白P1(SEPP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
4-溴-2-氟-1- 321-23-3川續(xù)斷皂苷 Ⅵ(木通皂苷 D)載脂蛋白B(APOB)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-氟苯甲 321-28-8人參皂苷 Rb3組織蛋白酶S(CTSS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-氟苯甲 321-28-8牡荊素(牡荊苷)血紅素結(jié)合蛋白(HPX)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
2-氟苯甲 321-28-8天然冰片(右旋龍腦)補體成分4(C4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
3,4-二氟三氟甲苯 32137-19-2β,β-二甲基烯酰阿卡寧血管活性腸肽(VIP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1,3-苯并噻唑-2-羧酸乙酯 32137-76-1白果新酸內(nèi)皮抑素(ES)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1,3-苯并噻唑-2-羧酸乙酯 32137-76-1香荊芥酚血管抑素(ANG)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1-氟萘 321-38-0甘油三油酸酯肌肉生長抑制素(MSTN)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1-氟萘 321-38-0甘油三亞油酸酯免疫球蛋白G2(IgG2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
1-氟萘 321-38-0十七碳酸甲酯末端補體復(fù)合體C5b-9(C5b-9)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
人烏頭酸酶2(ACO-2)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
人胰島素自身抗體(IAA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Trichoderma harzianum
小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA Kit,48T/96T 用途: 教學(xué)科研
大鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA Kit,48T/96T 用途: 生物防治
人胰多肽(PP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Penicillium aurantiogriseum
人胰高血糖素(GC)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Auricularia polytricha
人胰激肽原酶(PK)ELISA Kit,48T/96T 用途: 生物防治
人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus vallismortis
大鼠C型鈉尿肽(CNP)elisa試劑盒血液甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法定量 TRPV4 100 ul
真菌/酵母甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法定量 TSGA13 100 ul
植物甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法定量 TRPS1 20 ul
細菌甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法定量 TRPT1 100 ul
組織糖原磷酸化酶a(GLYCOGEN PHOSPHORYLASE)活性 酶連續(xù)循環(huán)比色法定量 TSHZ3 100 ul
動物組織鈉/鉀ATP酶(Na+/K+ -ATPase)活性比色法 定量 TRPV4 20 ul
組織3-羥-3-甲戊二酰輔酶A(HMG-COA)還原酶比色法 定量 TRPV5 100 ul
血液甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)活性比色法 定量 TRUB2 20 ul
細胞艾滋病1蛋白酶(HIV-1 PROTEASE)活性定量 TRPV6 100 ul
組織艾滋病1蛋白酶(HIV-1 PROTEASE)活性定量 TRPC4 100 ul
植物鎂ATP酶(Mg++ -ATPase)活性比色法定 TRPA1(Transient receptor potential cation channel subfamily A member 1) 100 ul
TSFM 100 ul
TSG101(Tumor susceptibility gene 101 protein) 100 ul
TRPM6 100 ul
TSGA10 300 ul
PDE10A(cAMP and cAMP-inhibited cGMP 3′,5′-cyclic phosphodiesterase 10A) 100 ul
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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