微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

我司專業(yè)代理ATCC菌種，竭誠為大中型科研提供嚴格質(zhì)量體系控制ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。批量訂購可享受*，我司可提供完整的售前、售中和售后服務(wù)。

菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

氧化銅 40nm 球形，99.5%3,4-苯并芘標(biāo)準(zhǔn)溶液 5.25μg/mL，基體：甲Human Receptor for advanced glycation end products, RAGE/AGER ELISA Kit  人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體

納米三氧化二鐵（α- Fe2O 30nm 球形，99.5%,α型正丁 for HPLC，≥99.7% (GC) Human Glucagon,GC ELISA Kit  人胰高血糖素

納米磁性氧化鐵（γ-Fe2O3 20nm 球形，99.5%,γ型酸 SPHuman Pancreatic Polypeptide,PP ELISA Kit  人胰多肽

氧化釓 9.8% metals basis，<100 nm (XRD) 異丁酯 99%Human insulin autoantibodies,IAA ELISA Kit  人胰島素自身抗體

納米氧化鈥 99.9% metals basis,<100 nm particle size (BET)二 98%（劇品）Human glutamic acid decarboxylase,GAD ELISA Kit  人谷脫羧

納米四氧化三鐵 99.5%,20nm 球形溴代硝烷 90%Human Thymopentin,TP-5 ELISA Kit  人

納米四氧化三鐵分散液 10-30 nm, 25% in H2O1,4-雙（5-苯基-2-惡唑基）苯 98%Human Thymosin ELISA Kit  人

氧化鑭 99.99% metals basis,50nm4-丁基苯甲酸 99%Human Non-Phosphorylated Insulin-like growth factor binding protein 1 ELISA Kit  人未化類胰島素生長因子結(jié)合蛋白-1

銅綠假單孢菌2,6-二-3-硝吡 97%MBP(Myelin Basic Protein, MBP)peptide  髓鞘堿性蛋白(多肽抗原)猴血管活性腸肽受體1(VIPR1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

二氫 分析標(biāo)準(zhǔn)品 Bursin  囊素三肽/三肽囊素/雞法氏囊三肽猴神經(jīng)鈣黏蛋白(NCAD)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

二氫 90%NPY ( Neuropeptide Y)1-36  神經(jīng)肽 Y（1-36多肽）猴補體成分9(C9)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒  

(-)-表沒食子兒茶素 ≥98% (HPLC)Leupeptin   亮抑肽猴質(zhì)金屬蛋白-10(MMP-10)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(-)-表沒食子兒茶素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%GRP( Gastrin Releasing Peptide )  促胃泌素釋放肽（抗原）猴卵泡抑素樣蛋白1(FSTL1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

大黃素 ≥90% (HPLC)BSA(標(biāo)準(zhǔn))  牛血清白蛋白（標(biāo)準(zhǔn)）猴尿激型纖溶原激活因子(PLAU/uPA)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

表兒茶素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%MBP (Myelin Basic Protein, Rat)peptide  髓鞘堿性蛋白(多肽）大鼠猴神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

秦皮素 99%MOG35-55 (myelin oligo-dendrocyte glycoprotein-MOG)  髓鞘少樹突膠質(zhì)糖蛋白(抗原)猴粘蛋白20(MUC20)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

(-)-表沒食子兒茶素沒食子酯 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%IGF-I( Insulin-like Growth Factor-I )  胰島素樣生長因子-I（抗原）猴心肌營養(yǎng)素合成/心脂合(CLS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

 99%VIP (Vasoactive Intestinal peptide)  血管活性腸肽猴精氨酰tRNA合成(RARS)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

表告依春  98%IGF-II( Insulin-like Growth Factor-II )  胰島素樣生長因子-II（抗原）猴結(jié)締組織生長因子(CTGF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

阿魏 99%TP-5(Thymopentin)  猴白血病抑制因子(LIF)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

漆黃素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥98%Galanin  肽（抗原）猴IV型膠原α1(COL4α1)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

漆黃素 98%GLP-2(Glucagon-like peptide-2)  胰高血糖素樣肽-2蛋白猴過氧化物體膜蛋白3(PMP3)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒

高良姜素 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99%ADNP (NAP) (Activity-dependent Neuroprotective protein )  活性依賴的神經(jīng)保護肽(抗原）猴表皮角蛋白(EK)聯(lián)免疫吸附測定試劑盒