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大鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)elisa試劑盒
檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450 nm處測吸光值。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)elisa試劑盒 |
英文名稱 | Rat Calreticulin,CRT ELISA Kit |
貨號 | GOY-R74289 |
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實驗流程:
1. 實驗前標(biāo)準(zhǔn)品、試劑及樣本的準(zhǔn)備;
2. 加樣(標(biāo)準(zhǔn)品及樣本)100µL,37°C孵育1小時;
3. 吸棄,加檢測溶液A100µL,37°C孵育1小時;
4. 洗板3次;
5. 加檢測溶液B100µL,37°C孵育30分鐘;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分鐘;
8. 加終止液50µL,立即450nm讀數(shù)。
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公司采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強,無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。
操作步驟:
1)運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
大鼠鈣網(wǎng)蛋白(CRT)elisa試劑盒樣品收集、處理及保存:
1).細(xì)胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集細(xì)胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
2)細(xì)胞:用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次,調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右,通過反復(fù)凍融,使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份,或者細(xì)胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。
3)血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。
4)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
5)體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。
6.)組織標(biāo)本:切取組織標(biāo)本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進(jìn)行檢測。
樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果樣品不能立即檢測,應(yīng)將其分裝,-70 ℃保存,避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
白介素2(IL2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 三葉草根瘤菌 100g
CD30配體(CD30L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 紫孢側(cè)耳(美味側(cè)耳) 25g
CD40配體(CD40L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 枯草芽孢桿菌 5g
CD40配體(CD40L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% pQE31 1g
CD40配體(CD40L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 刺毛殼 25g
CD40配體(CD40L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 小鼠小短桿菌 5g
CD40配體(CD40L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 巴斯德畢赤酵母 1g
CD40配體(CD40L)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 5g
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 大腸埃希菌 25g
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 德爾布有孢酵母 5g
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 乳桿菌屬 1g
胞外超氧化物歧化酶(SOD3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 95% 盤多毛孢菌 5g
免疫球蛋白A(IgA)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 近平滑假絲酵母 25g
反胰島素樣生長因子2(IGF2AS)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 松木層孔菌 5g
干擾素α(IFNα)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 變化賴氨酸芽孢桿菌 25mg
甲胎蛋白(αFP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 枯草芽孢桿菌 1g
色素上皮衍生因子(PEDF)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 97% 硫磺絢孔菌 250mg
角蛋白18(KRT18)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 1 M in Tetrahydrofuran 釀酒酵母 100g
細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)比色法定量 EDC4 100 ul
細(xì)胞ERK蛋白表達(dá)熒光定量 CXCL17 100 ul
ERK蛋白表達(dá)西方雜交分析 DEFB121 100 ul
ERK蛋白免疫共沉淀分析 DNAJB11 100 ul
ERK蛋白表達(dá)定量 CTRP6 100 ul
細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀 DNAJB4 100 ul
載玻片細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡 Cyclin T1 100 ul
冰凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡 DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) 100 ul
石蠟切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)熒光顯微鏡 CYGB(Cytoglobin) 20 ul
載玻片細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 Cytohesin 1 100 ul
冰凍切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 DOCK180 20 ul
石蠟切片組織GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡 DAPK1 100 ul
細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)比色法定量 DNAJC2/MPP11 100 ul
細(xì)胞GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)熒光定量 DNAJB(DnaJ homolog subfamily B member 8) 100 ul
GSK-3ALPHA蛋白表達(dá)西方雜交分析 DCBLD2 100 ul
GSK-3ALPHA蛋白免疫共沉淀分析 DOCK180 100 ul
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