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選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
產(chǎn)品名稱:大鼠CD68分子(CD68)elisa試劑盒
英文名稱:Rat Cluster of Differentiation 68, CD68 ELISA kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結(jié)果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
4-(三氟甲基) 32857-62-83,6-二芥子?;崽敲庖咔虻鞍捉Y(jié)合蛋白1(IGBP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
鄰三氟甲氧基苯酚 32858-93-8細葉遠志皂苷黃體激素(LH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥97%
鄰三氟甲氧基苯酚 32858-93-8遠志口山酮微管關聯(lián)蛋白τ(MAPτ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)≥97%
麥芽三糖 32860-62-1桔梗皂苷D微管關聯(lián)蛋白τ(MAPτ)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
3-溴肉桂酸,主要為反式 32862-97-8寶藿苷Ⅰ血幼素(HJV)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
3-溴肉桂酸,主要為反式 32862-97-8王不留行黃酮苷Ⅱ型膠原α1(COL2α1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)98%
二酸叔丁基乙酯 32864-38-3槲皮素-3-O-β-D- 葡萄糖乙脫氫酶1(ADH1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
二酸叔丁基乙酯 32864-38-3偽原薯蕷皂苷(暫行)線粒體乙脫氫酶(ALDM)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)95%
3-羥基-5-(三氟甲基)苯甲酸 328-69-8巴豆苷乙脫氫酶7(ADH7)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
3-羥基-5-(三氟甲基)苯甲酸 328-69-8新橙皮苷磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)99%
1,3-雙(三氟甲基)-5-溴苯 328-70-1絡石苷過氧化氫酶(CAT)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1,3-雙(三氟甲基)-5-溴苯 328-70-1α-松油(暫行)肝型脂肪酸結(jié)合蛋白(FABP1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1,3-雙(三氟甲基)-5-溴苯 328-70-1楊梅苷孕酮(Pg)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1--3,5-雙(三氟甲基)苯 328-73-4竹節(jié)參皂苷ⅠVa (暫行)微管關聯(lián)蛋白2(MAP2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
1--3,5-雙(三氟甲基)苯 328-73-4三百草酮血管內(nèi)皮生長因子受體1(VEGFR1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)97%
人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Cladosporium herbarum
人微管相關蛋白2(MAP-2)ELISA Kit,48T/96T 用途: 資源真菌
人黑色素瘤相關抗原(MAGE)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Penicillium janczewskii
人套膜蛋白(iNV)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces glaucus
人鳥氨酸脫羧酶(ODC)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Bacillus pumilus
人轉(zhuǎn)移因子(TF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces luridus
人纖維母細胞表面抗原(FSP)ELISA Kit,48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces olivaceus
人胃粘液素(GM)ELISA Kit,48T/96T 規(guī)格: 冰袋泡沫盒快遞
大鼠CD68分子(CD68)elisa試劑盒乙?;惗∠惴?/font> ≥98%, FCC鋅指蛋白IKAROS抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性比色法定量檢測試劑盒FMOC-D-3-(3-吡啶基)-氨酸 98%白細胞粘附蛋白抗體流式免疫組化乙酸異龍腦酯 90%免疫球蛋白j鏈抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-1)活性熒光定量檢測試劑盒Fmoc-L-瓜氨酸 98%凝溶膠蛋白抗體流式免疫組化乙位紫羅蘭 97%5-三磷酸肌受體1抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP1/8/13)原位明膠酶譜法(in situ zymography)熒光染色試劑盒Fmoc-3-L-氨基丁酸 98%生長調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生長激因子α 抗體流式免疫組化異甲基紫羅蘭70 60-70%5-三磷酸肌受體2抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性比色法定量檢測試劑盒(3S)-3-(芴甲氧羰基氨基)-5-氧代-5-(*基氨基)戊酸 96% 兔抗小鼠IgA抗體流式免疫組化甲酸異戊酯 93%DNA結(jié)合抑制因子3抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性熒光定量檢測試劑盒Fmoc-L-β-谷氨酸-5-叔丁基酯 98%胰十二指腸同源異型盒基因抗體流式免疫組化甲酸異戊酯 mixture of isomers, ≥97%, FG誘導協(xié)同刺激分子配體CD275抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性比色法定量檢測試劑盒Fmoc-L-beta-高谷氨酸 6-叔丁酯 98%piwi樣1蛋白抗體流式免疫組化異戊酯 97%免疫球蛋白超家族成員12抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-12)活性熒光定量檢測試劑盒Fmoc-L-beta-高異亮氨酸 98%促甲狀腺素受體抗體流式免疫組化2-甲基丁酸異酯 Kosher, ≥98%草酰琥珀酸脫羧酶α抗體細胞基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-13)活性比色法定量檢測試劑盒Fmoc-O-芐基-L-4-羥基脯氨酸 98%谷胱甘肽還原酶
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
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