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微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
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產(chǎn)品名稱 | 用途 | 貨號 |
Pantoeastewartiisubsp.stewartii | 僅供科研 | GOY-01J7450
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菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種(一級種)、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍*的微生物保存法。
99.99% metals basis鋱標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlanti-AQP1/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-1抗體IgG
SP1000µg/mL,基體:10%HClAnti-AQP-2/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-2蛋白抗體IgG
ACS銩標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AQP-3/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-3抗體IgG
99.999% metals basis銩標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mL,基體:10%HCLAnti-AQP4/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-4蛋白抗體IgG
5-磺基水楊酸 二水合物 AR, ≥99.0%釩標(biāo)準(zhǔn)溶液1 mg/ml V(3+),溶劑:2%硝酸,用于 AAS Anti-AQP5/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-5抗體IgG
5-磺基水楊酸 二水合物 電泳, ≥99%釩標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/mlAnti-AQP7/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-7抗體IgG
5-磺基水楊酸 二水合物 ACS, ≥99.0%釩標(biāo)準(zhǔn)溶液 500mg/L,溶劑:水Anti-AQP9/FITC 熒光素標(biāo)記水通道蛋白-9抗體IgG
蔗糖 ACS釩標(biāo)準(zhǔn)溶液 100mg/L,基體:1%HCI Anti-AR/FITC 熒光素標(biāo)記雄受體抗體IgG
Pantoeastewartiisubsp.stewartii2-二環(huán)己-2',4',6'-三異聯(lián) 97%人肌球蛋白輕鏈激(MLCK)免疫試劑盒因子受體樣因子1抗體phospho-FAK(Tyr925) 化粘著斑激抗體
2-雙環(huán)己膦-2',6'-二氧聯(lián) 95%人肌球蛋白(MYS)免疫試劑盒半胱氨亞磺脫羧抗體Phospho-FAK(Tyr861) 化粘著斑激抗體
二膦 95%人肌強直蛋白蛋白激(DMPK)免疫試劑盒型肝炎NS2反式調(diào)節(jié)蛋白/衰老相關(guān)的因10蛋白抗體phospho-FAK(Tyr577) 化粘著斑激抗體
2,5-二吡咯 98%人肌聯(lián)蛋白(TTN)抗體免疫試劑盒固酮合成CYP11B2抗體Phospho-FAK(Tyr576/577) 化粘著斑激抗體
3,4-乙烯二氧噻吩 99%人肌腱蛋白R(TN-R)免疫試劑盒分裂周期蛋白8抗體Phospho-FAK(Tyr407) 化粘著斑激抗體
亞麻 99%人肌紅蛋白(MYO/MB)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體phospho-FAK(Ser732) 化粘著斑激抗體
γ-亞麻 97%人肌酐(Cr)免疫試劑盒分裂周期蛋白16抗體phospho-FAK(Ser722) 化粘著斑激抗體
亞麻酯 80%人饑餓激素(GHRL)免疫試劑盒有絲分裂著絲粒蛋白F抗體phospho-FADD(Ser194) 化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體
1,3-雙(二膦烷)二化鎳 99%人活性氧(ROS)免疫試劑盒9號染色體開放閱讀框115抗體phospho-FADD(Ser194) 化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗體
雙[(2-二膦)] 98%人活化素受體樣激1(ALK1)免疫試劑盒CTDSPL蛋白抗體Phospho-FADD(Ser191) 化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
(R)-(-)-N,N-二-1-(2-聯(lián)膦)二茂鐵乙 97%人活化素A(ACV-A)免疫試劑盒CTDSPL2蛋白抗體Phospho-Ezrin (Tyr353) 化埃茲蛋白抗體
(S)-(+)-N,N-二-1-(2-聯(lián)膦)二茂鐵乙 97%人活化X(FXa)免疫試劑盒乙酰酯相關(guān)蛋白抗體Phospho-Ezrin (Thr567) 化埃茲蛋白抗體
2,3,5,6-四氟-7,7,8,-四二對醌 97%人活化Ⅻ(FⅫa)免疫試劑盒卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83抗體Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 化雌激素受體α抗體
三(2,4-二)膦 97%人活化蛋白C(APC)免疫試劑盒二氫嘧相關(guān)蛋白5抗體Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 化雌激素受體α抗體
7,7,8,8-四醌二 98%人混合系列蛋白激樣結(jié)構(gòu)域(MLKL)免疫試劑盒化二氫嘧樣2抗體Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 化雌激素受體ER alpha 抗體
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