產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品介紹：

名稱    小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞

2.組織來源：腦組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自腦皮層組織；大腦分左右兩個(gè)半球，大腦皮質(zhì)（灰質(zhì)）覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分，它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面，即外側(cè)面（約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3）、內(nèi)側(cè)面和底面（占2/3的面積）；半球表面有很多深淺不等的溝或裂，溝或裂之間的隆起叫回，它們大大增加了大腦的表面積；大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔，使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在銀浸染標(biāo)本中，少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小，其突起也較小而少，呈珠狀，故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。但是用特異性免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細(xì)胞，其突起并不少，而且還有許多分支。少突膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu)、協(xié)助生物電信號(hào)的跳躍式高效傳遞并維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能。其異常不僅會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變，還會(huì)引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病，甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分布和位置可分為三種：①束間少突膠質(zhì)細(xì)胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間；②神經(jīng)細(xì)胞周少突膠質(zhì)細(xì)胞（perineuronal-oligodendrocyte），分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū)，常位于神經(jīng)細(xì)胞周圍，與神經(jīng)細(xì)胞的關(guān)系密切，故又稱為神經(jīng)細(xì)胞周衛(wèi)星細(xì)胞（perineuronal-satellite-cell），但在神經(jīng)細(xì)胞胞體與此類細(xì)胞之間亦常有星形膠質(zhì)細(xì)胞的薄片狀突起分隔；③血管周少突膠質(zhì)細(xì)胞（pcrivascular-oligodendrocyte），主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周圍。少突膠質(zhì)細(xì)胞形成的髓鞘膜是最為特化和復(fù)雜動(dòng)物細(xì)胞膜之一，其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。如半乳糖腦苷脂（GC），它是髓鞘的一種主要類脂，用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來，神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進(jìn)展較快，更多的少突膠質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)記物被鑒定出來，如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。

5.方法簡介：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞采用消化、混合細(xì)胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

()實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GC（Galactocerebroside）免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

產(chǎn)品貨號(hào)CM-M186

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài)梭形、多角形

傳代特性不增殖；不傳代

消化液0.25%

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

處理方法：

收到細(xì)胞后，檢查外包裝是否完整，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好。如有破損漏液等問題，請(qǐng)即時(shí)聯(lián)系。并進(jìn)行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶外部。

2. 將細(xì)胞放入37度培養(yǎng)箱中預(yù)溫3-4小時(shí)后再做處理，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

3. 預(yù)熱培養(yǎng)基（含10%胎牛血清，1%雙抗）。

4. 顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照保存（40×,100×,200×各一張）。

5. ①若細(xì)胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加第四步中準(zhǔn)備的5-6ml培養(yǎng)基。放到37度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細(xì)胞密度達(dá)到80%以上，進(jìn)行傳代。

實(shí)驗(yàn)操作步驟：  

a．采用認(rèn)可的方案處死嚙齒動(dòng)物。

b．立即在無菌超凈臺(tái)內(nèi)用70％乙醇擦洗整個(gè)動(dòng)物。

c．用無菌的鑷子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用無菌鑷子將皮膚扯向后腿。

d．用另一無菌的剪刀和鑷子切開腹部，取出含有胚胎的子宮，置于無菌的培養(yǎng)皿上。

e．剔除胚胎周圍的包膜，將胚胎放于無菌的含有無菌PBS的100ml燒杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。繼續(xù)用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮為止。

注意事項(xiàng)：

1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn)，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件，取得最佳實(shí)驗(yàn)效果。

2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底，

避免開蓋時(shí)試劑損失。

3. 禁止與其他品牌的試劑混用，否則會(huì)影響使用效果。

4. 樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5. 最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿，可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗

并*清除殘留清潔劑。

6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。

2 ug pET-28a(+) pET-28a(+) 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

GVPC瓊脂基礎(chǔ) GVPC Agar Base 100g

1瓶 7WCY1.0細(xì)胞株 7WCY1.0 低溫運(yùn)輸和保存

1個(gè) 0.5mLDNA超濾離心管(150-250KD)  

250mg Poly(I).Poly(C) 本產(chǎn)品是雙鏈多聚脫氧核糖核苷酸，一條鏈?zhǔn)荌，一條鏈?zhǔn)荂，為凍干粉狀態(tài)，加水或TE緩沖液即可溶解，可用于誘導(dǎo)動(dòng)物產(chǎn)生干擾素，還可以用于在EMSA中作為非特異性的競爭劑。 Poly(I).Poly(C)

250m?嵌?L?

小鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞Glypican 4  磷脂?；嫉鞍拙厶?4抗體 規(guī)格: 0.2ml

Amylin  糖尿相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體 規(guī)格: 0.1ml5-HTR1B  5-羥色胺受體1B抗體 0.1ml

CLEC2D/OCIL  CLEC2D蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

TET1/CXXC6  Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNRP1/CD304  神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

10g 酸洗玻璃珠 Acid-Washed Glassbeads 常溫

phospho-Syntaxin 1a(Ser14)  磷酸化突觸融合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

250mL Citrate Buffer（檸檬酸鹽緩沖液）,0.5M,pH5.0   Citrate Buffer,0.5M,pH5.0   常溫保存

1 管 JM83大腸桿菌 JM83 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pYD1 pYD1 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

KEA肉湯 KEA Broth 250g

200 mL 人中性粒細(xì)胞分離液1.085 Cell Separation Solution -20℃保存

2 ug pcDNA3.1（+）/His pcDNA3.1（+）/His 低溫運(yùn)輸，-20℃保存

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等；

適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。

6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)

可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。