保存方法：

傳代保存法：培養(yǎng)基的濃度不宜過高，營養(yǎng)成分不宜過于豐富，尤其是碳水化合物的濃度應在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于最適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種，則應在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣 [3] 。

液體石蠟覆蓋保存法：該法較前一種方法保存菌種的時間更長，適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧細菌等的保存。

懸液保存法：

① 蒸餾水保存法：適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌，將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應注意避免水分的蒸發(fā)。

② 糖液保存法：適用于酵母菌，如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗處保存，可長達10年。除此之外，也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。

載體保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅膠保存法；④磁珠保存法；⑤麩皮保存法；⑥紙片(濾紙)保存法。

常用的冷凍保存法：

① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便，也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多，有些可添加保護劑。此外，也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi)，再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即將菌種管插入干冰內(nèi)，再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是適用范圍*的微生物保存法。

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菌種的培養(yǎng)：

1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質組成的繁殖材料。菌種分為母種（一級種）、原種（二級種）和栽培種（三級種）三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種，其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復篩。

2、挑選具有某種能力的有用菌種，也稱種子制備，是指菌種在一定條件下，經(jīng)過擴大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質量的純生產(chǎn)菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進一步擴大菌體量及合成產(chǎn)物之用。

3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。

4、保存在沙土管或冷凍管中的生產(chǎn)菌種，用無菌手續(xù)挑取少許，接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上，在25℃（或較高溫度）下培養(yǎng)5～7天（或較長時間。所得孢子還需進一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子（對于霉菌類孢子制備，多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基）。

5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液，接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上，于25～28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在生產(chǎn)上延續(xù)使用半年左右。

6、如果有些生產(chǎn)菌種不產(chǎn)孢子，如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的，則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體，作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應是易于被菌體利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米漿），及無機鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯，無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%～20%。

微生物菌種的培養(yǎng)：

⒈ 孢子制備

⑴ 孢子的制備

一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分，如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1％，氮源不超過0.5％)，碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境，不利于形成，氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下，干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導孢子形成。面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃，少數(shù)為37 ℃，培養(yǎng)時間為5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制備　

霉菌的孢子培養(yǎng)，一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖，而且這類培養(yǎng)基的表面積較大，可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25～28 ℃，培養(yǎng)時間為4～14天。

⒉ 種子制備

⑴ 搖瓶種子制備　

搖瓶種子進罐，常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng)，有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*，并易被菌體分解利用，氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃，子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高，更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。

⑵ 種子罐種子制備　

種子罐種子制備的工藝過程，因菌種不同而異，一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中，經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲，這樣的種子稱為一級種子，把一級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi)，經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲，這樣制備的種子稱為二級種子，將二級種子轉入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵，稱為三級發(fā)酵。同樣道理，使用三級種子的發(fā)酵，稱為四級發(fā)酵。

N-苯甲酰-L-乙酯 98%L-去腺素 98%Anti-SCP3/FITC  熒光素標記聯(lián)會復合體蛋白3抗體IgG

N-(叔丁氧羰基)乙 96%側鏈酸 98%Anti-Secretin/FITC  熒光素標記分泌素抗體IgG

卡特縮合劑 98% 5-芐硫基四氮唑 98.5%Anti-Secretin receptor/FITC  熒光素標記分泌素受體抗體IgG

舒緩激肽三醋酸鹽  95%5-巰基-1-甲基四唑 98%Anti-SEL1L/FITC  熒光素標記SEL1L抗體IgG

BOC-L- 98%甲氧基鹽酸鹽 98%Anti-Selenoprotein W/FITC  熒光素標記硒蛋白W抗體IgG

BOC-L- 97%疊氮鈉 AR,99%（劇品）Anti-Sema3A/FITC  熒光素標記臂板蛋白3A抗體IgG

S-芐基-L-半胱 98%四氮唑乙酸 98%Anti-Sema3F/FITC  熒光素標記臂板蛋白3F抗體IgG

Boc-L-天冬 4-芐酯  98%油酸 ARAnti-Sema4C/FITC  熒光素標記臂板蛋白4C抗體IgG

雪腐鐮刀菌芴氧羰酰 98%小鼠神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)免疫試劑盒丁酰輔A合成3抗體TG  兔抗狀腺球蛋白

芴氧羰酰 99%小鼠神經(jīng)粘附分子1(NCAM1)免疫試劑盒脂肪源性亮氨氨肽抗體（血管內(nèi)皮生長因子誘導蛋白）TFR2/Transferrin Receptor 2  轉鐵蛋白受體2抗體

4-(羥)氧乙 98%小鼠神經(jīng)特異性烯化(NSE)免疫試劑盒線粒體凋亡誘導因子2抗體TFPI-2  組織因子途徑抑制劑-2抗體

并三氮唑-N,N,N',N'-四脲六氟酯 99%小鼠神經(jīng)肽Y(NPY)免疫試劑盒ABL2蛋白抗體TFPI/LACI  組織因子途徑抑制劑抗體

1-羥-并-三氮唑(無水) 99%小鼠神經(jīng)絲蛋白L(NF-L)免疫試劑盒血管緊張素轉換ACE1抗體TFF3  三葉肽因子3抗體

3-羥-1,2,3-并三-4(3H)-酮 98%小鼠神經(jīng)生長因子前體(proNGF)免疫試劑盒血管緊張素轉換2抗體TFF2  三葉肽因子2抗體

2-(7-偶氮并三氮唑)-N,N,N',N'-四脲六氟酯 99%小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)免疫試劑盒Acinus抗體TFF1/BCEI  癌雌激素誘導蛋白抗體

1-羥-7-偶氮并三氮唑 99%小鼠神經(jīng)膠質纖維性蛋白(GFAP)免疫試劑盒醋激1抗體TFEB  T淋巴轉錄調節(jié)因子TFEB抗體

N-羥-5-降稀-2,3-二酰亞 99%小鼠神經(jīng)調節(jié)蛋白4(NRG4)免疫試劑盒促皮質激素(1-39)抗體TFE3  轉錄因子E3

N-羥琥珀酰亞 98%小鼠神經(jīng)調節(jié)蛋白3(NRG3)免疫試劑盒促皮質激素ACTH(18-39)抗體TFDP3  轉錄因子DP3抗體（肝癌相關抗原661）

N-羥硫代琥珀酰亞 98%小鼠神經(jīng)調節(jié)蛋白2(NRG2)免疫試劑盒促皮質激素ACTH (7-23)抗體TFDP2/DP2  轉錄因子E2F二聚體蛋白2抗體

4-羥 99%小鼠神經(jīng)調節(jié)蛋白1(NRG1)免疫試劑盒活性依賴的神經(jīng)保護肽抗體TFCP2C  轉錄因子CP2抗體

3-羥-9H-占噸-9-酮 98%小鼠上皮中性?；罨?8(ENA-78/CXCL5)免疫試劑盒α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體TFAR19/PDCD5  凋亡相關蛋白5抗體

1,2-二氫-2-異丁氧喹啉-1-異丁酯 98%小鼠山梨脫氫(SDH)免疫試劑盒α1性糖蛋白2抗體（類粘蛋白2）Tetraspan 5  四分子交聯(lián)體5抗體

異烯酯 98%小鼠沙眼衣原體抗體IgG(CT IgG)免疫試劑盒化水通道蛋白2抗體Tetranectin/CLEC3B/TNA  四連接素TN抗體