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產(chǎn)品名稱:大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)elisa試劑盒
英文名稱:Rat Thyroid-Peroxidase,TPO ELISA Kit
規(guī)格:48T/96T
保存: 2-8℃(頻繁使用時);-20℃(長時間不用時)。
有效期: 6 個月(4℃);12 個月(-20℃)。
用途: 用于體外定量分析人血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清、細胞裂解液
選擇ELISA試劑盒應從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價。
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具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費。
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標準品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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注意事項:
1加樣:
①實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學梯度會造成“邊緣效應”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復合物脫離;
②洗板機洗板時應經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機器與人工洗滌相結合的方法,在機器洗滌后再進行人工洗板1-2次,或適當增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應條件為37℃或室溫反應15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結果時,反應板應水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標儀讀取結果,酶標儀不應置于陽光或強光照射下,需先預熱15-30 min再進行測試。
操作流程如下:
(1)僅用于科研待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
核仁磷酸蛋白3(NPM3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 黃蓋小脆柄菇 5g
軸突蛋白2(NRXN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 90% 芝麻?;汀?g
軸突蛋白3(NRXN3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 90% 接骨木鐮孢 5g
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白2(NXPH2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 雞傷寒沙門氏菌 25g
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白3(NXPH3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 布氏白僵菌 5g
神經(jīng)外營養(yǎng)蛋白4(NXPH4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 謝瓦氏曲霉 50mg
泛酸激酶2(PANK2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 蘋果鏈格孢 1g
泛酸激酶3(PANK3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 釀酒酵母 5g
泛酸激酶4(PANK4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 阿布拉鏈霉菌 25g
葡萄糖磷酸變位酶5(PGM5)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 異樣纖維單胞菌 5g
磷酸甘露糖酶1(PMM2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 瑞士乳桿菌 100g
蛋白O-甘露糖基轉(zhuǎn)移酶2(POMT2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 橙色桿菌屬 25g
外周蛋白(PRPH)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 貝倫格葡萄座腔菌梨生?;汀?00g
過氧化還原酶3(PRDX3)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 豌豆根瘤菌 1g
過氧化還原酶4(PRDX4)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 氧化節(jié)桿菌 5g
過氧化還原酶6(PRDX6)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 細孢毛霉 1g
核糖體結合糖蛋白Ⅱ(RPN2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 99% 植物乳桿菌植物亞種 250mg
Clavesin 1蛋白(CLVS1)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 98% 吸水鏈霉菌 100g
大鼠甲狀腺過氧化物酶(TPO)elisa試劑盒人免疫球蛋白D(IgD)免疫試劑盒細胞角蛋白14抗體PCR級無離子純水用于植物細胞培養(yǎng), ≥99.5%裸鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA試劑盒,人免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒神經(jīng)細胞NB3特定蛋白抗體PCR探針TAG聚合酶標記試劑盒USP豬鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1(GSLT1)ELISA試劑盒,人免疫球蛋白A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)免疫試劑盒促胃泌素受體抗體PDGF-A(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)≥99.999% (metals basis)豬流行性腹瀉病抗體(PEDV)ELISA試劑盒,人免疫核糖核酸(Irna)免疫試劑盒因單克隆抗體PDGF-A蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒農(nóng)殘級, ≥99.5%魚類白介素1β人糜蛋白酶免疫試劑盒2號染色體開放閱讀框72抗體PDGF-A蛋白免疫共沉淀分析試劑盒用于分子生物學, ≥99.5% (AT)乙酰胺瓊脂 用于綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)(GB標準)人錳超氧化物歧化酶(SOD2)免疫試劑盒細胞間粘附分子3抗體PDGF-B(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)99.99% metals basisDL-賴氨酸人鎂依賴性磷酸酶1(MDP1)免疫試劑盒染色質(zhì)結合蛋白Cbx8抗體PDGF-B蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒化 GR,99.8%長春胺 Vincamine人梅螺旋體(TP)抗體(IgM)免疫試劑盒降鈣素抗體PDGF-B蛋白免疫共沉淀分析試劑盒化 AR,99.5%鄰硝基-α-D-吡喃葡萄糖苷
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