elisa定量檢測試劑盒檢測系統(tǒng)可謂是免疫學反應應用到科研出產(chǎn)中為廣泛為敏捷的技術手段。自己也為此苦惱過很長一段時間,跟著自己技術水平得進步,或多或少地也把握了ELISA體系的脾氣,也是熟能生巧吧,現(xiàn)在做方陣,做ELISA已是輕車熟路了,以前檢測一種抗體用整整一下戰(zhàn)書還算得暈暈的,現(xiàn)在給我十個八個的從包被到顯色,一個工作日基本搞定??墒窃谛吕鲜植倏v過程中老是會泛起或大或小的題目,本人在剛開始做ELISA時就面對良多災題,固然有師兄師姐鋪路,但仍是經(jīng)常做得烏煙瘴氣,好比說花板,假陽性,全顯色,全部顯色,顯色比空缺還低。
常用封鎖劑有:0.05%-0.5%的BSA;10%的小牛血清或1%明膠;脫脂奶粉,比較價廉,可以高濃度使用(5%-10%);還有一些稀有用到的各種動物血清(主要為了排除相似蛋白干擾)和酪蛋白等等。詳細的試驗還要有堅固的理論外也要實踐,看一下*可不可以應用到自己試驗當中去。但*選用什么,要依據(jù)試驗詳細來實踐。應留意以下原理:因為蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用,這種物理吸附長短特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響,大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏水基團,故更易吸附到固相載體表面。小分子必需依賴和大的蛋白載體偶聯(lián)后才能固定在固相載體上。還有有的包被原可能不是蛋白,對于生物素和脂類物質(zhì)或小分子物質(zhì)我們要事先對其改造再加以包被,親和素生物素:先親和素先包被載體,加入生物素化的DNA,elisa定量檢測試劑盒這種包被方法平均、牢固,已擴大應用于各種抗原物質(zhì)的定量測定。常用的包被液除了剛才提到的pH9.6碳酸鹽緩沖液,還有pH7.2的磷酸鹽緩沖液和pH7-8的Tris-HCL緩沖液等等。
巨噬細胞炎性蛋白1βIgG 人微管相關蛋白2(MAP-2)
巨噬細胞炎性蛋白20IgG 人網(wǎng)膜素(omentin)
巨噬細胞炎性蛋白3β IgG 人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)
巨噬細胞炎癥蛋白-1γIgG 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)
巨噬細胞炎癥蛋白4IgG 人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)
巨噬細胞炎癥因子1αIgG 人外基質(zhì)磷酸糖蛋白(MEPE)
巨噬細胞移動抑制因子IgG 人唾液酸(SA)
聚集蛋白IgG 人脫氧尿三磷酸(DUTP)
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