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elisa定量檢測試劑盒實驗造成假陽性

時間:2018-2-5閱讀:96
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對于間接elisa定量檢測試劑盒標(biāo)本一般都要進(jìn)行稀釋,如果加樣不準(zhǔn)就會造成誤差,尤其當(dāng)稀釋倍數(shù)大時,很小的誤差,會導(dǎo)致較大的相對誤差,使陰性(或弱陽性)標(biāo)本呈陽性(或陰性)。加樣時應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。目前,大部分血站都已使用全自動酶免加樣系統(tǒng)處理標(biāo)本,可較好地避免以上誤差。 
洗滌 
在ELISA中正確的洗滌是保證得到可重復(fù)結(jié)果的關(guān)健一步,應(yīng)引起操作者重視。無論是手工操作還是機(jī)器操作,得出不正確的結(jié)果常與不正確的洗滌有關(guān),ELISA就是靠洗滌來達(dá)到分離游離和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。通過洗滌以消除殘留在板孔中沒能與固體抗原或抗體結(jié)合的物質(zhì),以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。 
 溫育 
每種都有其反應(yīng)模式,其中溫度和溫育時間控制是重要因素。因孵育溫度高,反應(yīng)時間長,會造成整板本底高,陽性率高。溫育一般用濕盒或水浴,反應(yīng)板不宜疊放,以保證各板溫度都能迅速平衡,為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋。 
酶標(biāo)儀判讀 
作為記錄測定結(jié)果的儀器,酶標(biāo)儀的性能穩(wěn)定與否,決定結(jié)果的可靠度。首先酶標(biāo)儀應(yīng)定期進(jìn)行保養(yǎng),對濾光片要定期校正;其次酶標(biāo)儀波長設(shè)置要正確,使用雙波長,一個檢測波長,一個參比波長,以消除微孔板底部劃痕、不平、指印或液面高度差異造成的光干擾。此外,在用酶標(biāo)儀讀數(shù)時先擦試微孔板底部并壓平板條。由于各種酶標(biāo)儀性能有所不同,使用中應(yīng)詳細(xì)閱讀說明書 
綜上所述,由于酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)目前在技術(shù)上缺乏標(biāo)準(zhǔn)化,盡管目前上以及我國有了部分標(biāo)準(zhǔn)血清或參比血清(血清盤)。但由于elisa定量檢測試劑盒受方法學(xué)及技術(shù)條件的限制,在酶聯(lián)吸附測定中有時不可避免的會出現(xiàn)一定的非特異性,但我們可以通過以上措施把非特異性顯色降至低限底,從而提高檢測的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
HPLC≥98%    光甘草定    20mg/支    Glabridin
HPLC≥98%    橙黃決明素    20mg/支    aurantio-obtusin
HPLC≥98%    荷葉堿    20mg/支    Nuciferine
HPLC≥99%    鷹嘴豆芽素A    20mg/支    Biochanin A
HPLC≥99%    10-羥基喜樹堿    20mg/支    10-hydroxycamptothecin
≥99%    可可堿    20mg/支    Theobromine
95%    D-松醇    20mg/支    D-Pinitol
HPLC≥98%    常春藤皂苷元    20mg/支    Hederagenin
HPLC≥98%    花椒毒素    20mg/支    8-Methoxypsoralen
HPLC≥98%    白花前胡醇    20mg/支    Peucedanol
elisa定量檢測試劑盒

 

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