TSZelisa試劑盒抗原或抗體包被時所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的曠地空閑,封鎖就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些曠地空閑,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。
包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗的特點和材料的性質(zhì)而選定。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置過夜,37℃中保溫2小時被以為具有平等的包被效果。特別是用單抗腹水直接包被時,因其中大量非抗體蛋白在包被時同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類似封鎖劑的作用。并非所有的ELISA固相均需封鎖,封鎖不當反而會使陰性本底增高。ELISA試劑盒脫脂奶粉也是一種良好的封鎖劑,其大的特點是價廉,可以高濃度使用(5%)??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。
高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當作封鎖劑使用,但因為奶粉的成份復(fù)雜,而且封鎖后的載體不易長期保留,因此在試劑盒的制備中較少應(yīng)用。ELISA試劑盒封鎖的手續(xù)與包被相類似。一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標記物是高活性的,操縱時洗滌*,不經(jīng)封鎖也可得到滿足的結(jié)果。封鎖是否必要,取決于ELISA的模式及詳細的實驗前提。
封鎖(blocking)是繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。包被好的TSZelisa試劑盒板干燥后放入密封袋或錫袋中,在低溫可保留數(shù)月。ELISA試劑盒包被的適當濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實驗與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。但在間接法測定中,封鎖一般是不可少的。
54761-04-5 YTTERBIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE HYDRATE 三氟甲磺酸鐿 英文名稱: 號:
54761-04-5 YTTERBIUM(III) TRIFLUOROMETHANESULFONATE HYDRATE 三氟甲磺酸鐿 英文名稱: 號:
547-58-0 Methyl orange;Gold orange;Helianthine B;Tropaeolin D;SodiuM p-diMethyl-aMinoazobenzene sulfonate;4-{[4-(DiMethylaMino)phenyl]azo} benzene sulfonic acid sodiuM salt;p-DiMethyl-aMinoazobenzene sodiuM sulfonate;C.I.13025 甲基橙;金蓮橙D;對二甲基氨基偶氮苯磺酸鈉 英文名稱: 號:
547-57-9 CI 13015 金蓮橙O 英文名稱: 號:
547-32-0 Sodium sulfadiazine 磺胺嘧啶鈉鹽 英文名稱: 號:
54723-94-3 AMMONIUM PHOSPHOMOLYBDATE HYDRATE 磷鉬酸銨 英文名稱: 號:
5470-96-2 2-Quinolinecarboxaldehyde 喹啉-2-甲醛 英文名稱: 號:
546-88-3 AcetohydroxaMic Acid 乙酰氧肟酸 英文名稱: 號:
TSZelisa試劑盒
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