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當(dāng)前位置:上海谷研實(shí)業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>人肌球蛋白輕鏈激酶elisa檢測(cè)試劑盒?操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。
豬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒phospho-ATP citrate lyase (Ser455)
豬游離脂肪酸(FFA)免疫試劑盒phospho-ATR (Ser428)
豬游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)免疫試劑盒AMN1
豬游離甲狀腺素(FT4)免疫試劑盒ALG11
豬胰高血糖素樣肽2(GLP2)免疫試劑盒AGPHD1
豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒ASGPR1
豬胰高血糖素(GC)免疫試劑盒ARSF
豬胰島素原(PI)免疫試劑盒ATXN3L
豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒ASTE1
豬胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒phospho-APG4B(Ser309)
豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)免疫試劑盒AFAP
豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)免疫試劑盒ADORA1
豬胰島素(INS)免疫試劑盒ARSB
豬一氧化氮(NO)免疫試劑盒A2BP1
豬氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)免疫試劑盒ADAM17
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒ARNT2
豬血小板衍生生長因子(PDGF)免疫試劑盒ABH8
豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒ABI3BP
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)免疫試劑盒ARHGAP20
豬血栓素A2(TXA2)免疫試劑盒ASB10
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