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牛BGH基因核酸檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣:
雙重核酸試劑盒(熒光PCR法) 1. 收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè), 2-8 ℃ 保存48 小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反復(fù)凍融。
2. 標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管,管加標(biāo)本稀釋液 900ul ,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。
3. 10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例: 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水)。
4. 洗滌液:用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水)
檢測(cè)程序:
1. 加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。
磷酸化蛋白激酶B2抗體
磷酸化鐵蛋白Fe65抗體
磷酸化鐵蛋白Fe65抗體
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體
磷酸化細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1抗體
發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體
磷酸化發(fā)育分化增強(qiáng)因子1抗體
蛋白激酶B3
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體
蛋白激酶A2抗體
血管緊張素Ⅱ受體2抗體
ASH1蛋白抗體
芳香乙酰胺脫乙酰基酶樣蛋白2抗體
血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移蛋白抗體
醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)抗體
膽汁酸結(jié)合蛋白DDH2抗體
血管生成素樣蛋白3抗體
甘油酯激酶線粒體抗體
磷酸化內(nèi)收蛋白a1抗體
自噬體ATG16L2蛋白抗體
睪丸酸性磷酸酶抗體
酸性磷酸酶抗體
極光激酶A相互作用蛋白1抗體
載脂蛋白樣蛋白6抗體
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