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氣單胞菌通用PCR試劑盒的PCR反應(yīng)條件設(shè)置：
a）預(yù)變性：95℃，5 min可以讓白細(xì)胞裂解，釋放可用于PCR擴(kuò)增的基因組DNA。請勿縮短時間或降低溫度。
b）退火溫度：退火溫度設(shè)置為引物Tm值即可。然而，使用高的退火溫度可以有效減少非特異性擴(kuò)增，并提高全血模板的擴(kuò)增效率。因此，如擴(kuò)增產(chǎn)物特異性較差，可以建立一個溫度梯度反應(yīng)去尋找引物模板適退火溫度。
c）延伸時間：按30 sec/kb設(shè)定，如不足30 sec，設(shè)置30 sec即可。
d）擴(kuò)增循環(huán)數(shù)：35個循環(huán)已可以擴(kuò)增足量產(chǎn)物。太多的循環(huán)將會導(dǎo)致非特異性擴(kuò)增增加。
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