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試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素elisa試劑盒水平。用純化的人白介素elisa試劑盒抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素,再與HRP標(biāo)記的白介素抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人白介素含量 。
根據(jù)前面說(shuō)到的elisa質(zhì)量控制中我們知道,由ELISA的性質(zhì)和來(lái)源,分為可測(cè)誤差、隨機(jī)誤差、人為誤差。在elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中,只有遵循它應(yīng)有的規(guī)則才能更好的完成實(shí)驗(yàn),對(duì)此,今天我們特別為您分析了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的幾大基礎(chǔ):
1.要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復(fù)到室溫,以使結(jié)果更穩(wěn)定。
2.實(shí)驗(yàn)時(shí),要使底物避光保存。
3.用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
4.吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
5.要保證移液槍的準(zhǔn)確性,誤差不能超過(guò)2%??捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行確定。但有專業(yè)人員進(jìn)行矯正。
6.要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)。
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