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在ELISA試劑盒供應商實驗中如何確立正常值?

時間:2018/10/30閱讀:227
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     ELISA試劑盒供應商研究真核基因的基礎的工作之一就是確定其轉錄終止位點,目前通用的方法是5′-RACE法,RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends)是Frohman發(fā)明的、通過PCR快速克隆cDNA末端的技術,它在不建立cDNA文庫的前提下,利用已知cDNA序列設計引物,通過往兩端延伸和擴增獲得其5′-端序列。本試劑盒就是根據(jù)5′-RACE原理而開發(fā),它具有下列特點:

1.    即開即用,客戶不需要單獨準備各種材料。

2.    反應條件經(jīng)過精心優(yōu)化,包括使用無RNase H活性的MMLV和優(yōu)化的引物。

      樣本正常的參考范圍,由于各個廠家的試劑及各個實驗室的做的結果都會有差異的,建議每個實驗室建立自己的參考范圍,正常標本要經(jīng)過多個項目的驗證保證樣本是正常的,一般情況有2種方法來確定正常的參考范圍,一種是用95%的可信區(qū)間來確定,即:正常樣本的平均值±1.96SD(標準差),一種是99%可信區(qū)間來確定即:正常樣本的平均值±2.576SD(標準差).任何參考范圍都不是的,有部分個體的值高一點或者低一點都是有可能的,所以根據(jù)各自的需求,去建立各自的可信區(qū)間參考范圍。

 

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