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小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子（MIF）Elisa KitMouse MIF ELISA Kit
小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子Elisa Kit圖片【實(shí)驗(yàn)用途】MIF, 巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子。MIF蛋白含114個(gè)氨基酸,分子質(zhì)量為12.5 k,由α鏈和β鏈組成三維晶體結(jié)構(gòu).初,T淋巴細(xì)胞被認(rèn)為是免疫系統(tǒng)中MIF的主要來源,后來發(fā)現(xiàn)單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、血液樹突細(xì)胞、B 淋巴細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、桿狀細(xì)胞、嗜堿性細(xì)胞都可以表達(dá)MIF。通過與MIF靶細(xì)胞表達(dá)的相應(yīng)受體結(jié)合發(fā)揮作用，從而激活信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，基因轉(zhuǎn)錄以及下游效應(yīng)分子的表達(dá)。MIF上調(diào)TLR4的表達(dá)，抑制p53活性。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體，經(jīng)生物素（biMIFin）標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng)；經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

試劑配制:
1、小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子Elisa Kit圖片酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
注意事項(xiàng)：
1加樣：
①小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子Elisa Kit圖片實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí)，可分批次操作，以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差；
②加酶試劑后，用吸水紙吸干孔外試劑；
③作定量試驗(yàn)時(shí)，使用加樣器加注試劑，并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性，此外，要做到一份樣本一個(gè)移液頭，防止交叉污染。
2.溫育：
①如有兩種溫度，盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件；
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察；
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會(huì)造成“邊緣效應(yīng)”，因此盡量采用水?。?/span>
3.洗板：
①手工洗板時(shí)，拍板時(shí)要垂直，避免交叉污染，用力不能過猛，防止抗原抗體復(fù)合物脫離；
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢，若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出；
③為了洗滌效果好，實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法，在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次，或適當(dāng)增加洗板的次數(shù)；
4.顯色：
ELISA試劑盒中，如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物，則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液；如以鄰苯二胺(OPD)為底物，則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑，要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光，但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定：
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成，定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí)，反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm；定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果，酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下，需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
?現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體轉(zhuǎn)錄因子A(TFAM)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體鐵蛋白(FTMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體鐵蛋白(FTMT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體鐵蛋白(MFRN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　線粒體超氧化物歧化酶(SOD2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　葡萄糖激酶調(diào)節(jié)蛋白(GKRP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　葡萄糖磷酸變位酶(PGM2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　葡萄糖磷酸變位酶1(PGM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　葡萄糖磷酸變位酶2樣蛋白1(PGM2L1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　葡萄糖磷酸變位酶3(PGM3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　葡萄糖磷酸變位酶5(PGM5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　外周蛋白(PRPH)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　芳烴受體抑制因子(AHRR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　Slit同源物1(Slit1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　SRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　磷酸肌醇-3-激酶催化亞基β肽(PIK3Cβ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng)　血管緊張素Ⅱ(ANGⅡ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)　規(guī)格：　48T/96T
小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子Elisa Kit圖片*　異土木香內(nèi)酯　規(guī)格:　20mg/支

*　鹽酸藥根堿　規(guī)格:　20mg/支

*　白屈菜紅堿　規(guī)格:　20mg/支

*　血根堿　規(guī)格:　20mg/支

*　氯化兩面針堿　規(guī)格:　20mg/支

*　高三尖杉酯堿　規(guī)格:　20mg/支

*　蘆竹堿　規(guī)格:　20mg/支

*　利血平　規(guī)格:　20mg/支

*　白楊素　規(guī)格:　20mg/支

*　石榴皮鞣素　規(guī)格:　10mg/支
操作步驟：
1）小鼠巨噬細(xì)胞移動(dòng)因子Elisa Kit圖片運(yùn)用前，將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫，防止加樣時(shí)參加很多的氣泡，發(fā)生加樣上的差錯(cuò)。
2）依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定，能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3）參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育1小時(shí)。
4）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
5）每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育30分鐘。
6）甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗刷液，振動(dòng)30秒，甩去洗刷液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷，洗刷次數(shù)添加一次。
7）每孔參加底物A、B各50ul，悄悄振動(dòng)混勻，37℃溫育10分鐘。防止光照。
8）取出酶標(biāo)板，敏捷參加50ul停止液，參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9）在450nm波利益測定各孔的OD值。