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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR檢測(cè)試劑盒>>熒光核酸試劑>> 5 g/25 gN-BOC-乙二胺 基因擴(kuò)增儀
產(chǎn)品名稱:N-BOC-乙二胺
規(guī)格:5 g/25 g
貨號(hào):BJP1263
分類:熒光核酸試劑
產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
染料法
探針法
可進(jìn)行相對(duì),定量表達(dá)分析,定性分析,SNP檢測(cè)等
實(shí)驗(yàn)報(bào)告
·電泳圖 ·標(biāo)準(zhǔn)曲線
·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線
·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
5. 保存:如果樣本收集后不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
探針法:
aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對(duì)。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對(duì)時(shí),熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí),聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對(duì)于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
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檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。
操作程序:
由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料(如:基因名稱、序列等信息),我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線;
商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等,并簽定技術(shù)服務(wù)合同。
有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本(100mg組織或107個(gè)細(xì)胞),本公司不接受您提供的RNA樣本
PCR所需引物/探針(如果用探針法),可以由您自己提供,也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成(費(fèi)用另計(jì))。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。
產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告,包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。
客戶只需提供樣品和待檢測(cè)基因名稱即可。由我們提取RNA,設(shè)計(jì)并合成引物,完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析,提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。
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人Ⅰ型前膠原氨基端肽 Kit品牌Ret (E1N9A) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
N-BOC-乙二胺Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于L. buchneri MD-1的乳酸脫氫酶基因ldhD的表達(dá)培養(yǎng)基: 33生長(zhǎng)條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Acremonium│sp.斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抗癌活性培養(yǎng)基: CM0014生長(zhǎng)條件: 28C存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥
Clitocybe│maxima (Gartn. & G. Mey.) P. Kumm.分離基物: 子實(shí)體斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長(zhǎng)條件: 28存儲(chǔ)條件: 定期移植法
Debaryomyces│hansenii凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 20℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Bacillus│cereus分離基物: 口防風(fēng)凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 抑制沙門氏菌、抑制梨黑霉病原菌、抑制炭疽霉病原菌培養(yǎng)基: CM0003生長(zhǎng)條件: 35-37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法
Escherichia│coli分離基物: 死亡仔豬十二指腸凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;
Escherichia│coli斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 保存HIV gag的NC區(qū)基因,載體pcDNA3.1,N端Luc標(biāo)簽培養(yǎng)基: CM0033生長(zhǎng)條件: 37C存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)
Neurospora│crassa凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: crisp培養(yǎng)基: 0014生長(zhǎng)條件: 25-28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Idiomarina│sp.分離基物: 鹽礦沉積物凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: yes培養(yǎng)基: 444生長(zhǎng)條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;礦物油法;定期移植法
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