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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
CIDEB抗體 | CIDEB | BJ-K7974 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細(xì)胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細(xì)胞混合,人工誘導(dǎo)細(xì)胞融合。
3.細(xì)胞融合:淋巴細(xì)胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細(xì)胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細(xì)胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細(xì)胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細(xì)胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細(xì)胞,通常需要補體或吞噬細(xì)胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細(xì)胞進行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾病:診斷病毒引起的疾病和用癌細(xì)胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
FB2配套試劑(吖啶黃素、萘啶酮酸、氯化鋰)支氣管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基小氣道上皮細(xì)胞ICAD(Inhibitor of Caspase-Activated DNase ) Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抑制劑(抗原)
Fraser/Half Frase/FB1添加劑(A和B)小氣道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基肺成纖維細(xì)胞IDE 胰島素降解酶(抗原)
FB2添加劑骨骼肌細(xì)胞培養(yǎng)基支氣管平滑肌細(xì)胞IGF-1 R 人胰島素樣生長因子-I受體
Fraser肉湯/FB2基礎(chǔ)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基小氣道平滑肌細(xì)胞IGFBP-5 ( Insulin-like Growth Factor Binding Protein 5、IBP5) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白-5(抗原)
Half Fraser肉湯/FB1基礎(chǔ)上皮細(xì)胞培養(yǎng)基-2氣管平滑肌細(xì)胞Isulin 胰島素(抗原)
BLEB基礎(chǔ)動物上皮細(xì)胞培養(yǎng)基支氣管成纖維細(xì)胞APC(Activated protein C) APC活化蛋白C抗原
UVM培養(yǎng)基腎系膜細(xì)胞培養(yǎng)基心房肌細(xì)胞Apelin 脂肪炎癥因子Apelin抗原
LPM瓊脂基礎(chǔ)尿道上皮細(xì)胞培養(yǎng)基心室肌細(xì)胞Apelin receptor/APJ receptor Apelin receptor抗原
gremlin/FITC 熒光素標(biāo)記骨形態(tài)形成蛋白拮抗蛋白IgG19號染色體開放閱讀框5110-苯基-9-蒽酸Rat Pg (Progesterone) 檢測試劑盒
GRGDS/FITC 熒光素標(biāo)記抗粘附多肽IgG19號染色體開放閱讀框52甲酸葉酯Rat PGR (Progesterone Receptor) 檢測試劑盒
GRO Alpha/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因αIgG19號染色體開放閱讀框55酸葉酯Rat FSTL1 (Follistatin Like Protein 1) 檢測試劑盒
GRK1/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白偶合受體激酶1IgG19號染色體開放閱讀框566-羧基熒光素二乙酸酯Rat PHB (Prohibitin) 檢測試劑盒
GRK2/FITC 熒光素標(biāo)記G蛋白偶合受體激酶2IgG19號染色體開放閱讀框576-羧基熒光素二乙酸酯Rat PI (Proinsulin) 檢測試劑盒
GRO Beta/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗生長調(diào)節(jié)致癌基因βIgG19號染色體開放閱讀框61乙酸釹(III) 水合物Rat PK2 (Prokineticin 2) 檢測試劑盒
GRM1/FITC 熒光素標(biāo)記代謝型谷氨酸受體1IgG19號染色體開放閱讀框77乙酸釹(III) 水合物Rat PKR1 (Prokineticin Receptor 1) 檢測試劑盒
GRM2/FITC 熒光素標(biāo)記代謝型谷氨酸受體2IgG核DNA結(jié)合蛋白C1D咪唑-2-甲酸乙酯Rat PCNA (Proliferating Cell Nuclear Antigen) 檢測試劑盒
CIDEB抗體枝孢屬Mouse NFkB (Nuclear Factor Kappa B) Kit
香菇Mouse NFIL3 (Nuclear Factor, Interleukin 3 Regulated) Kit
謝瓦曲霉Mouse NF-κB p65 (Nuclear Factor-κB p65) Kit
南極世宗Mouse NRIP1 (Nuclear Receptor Interacting Protein 1) Kit
傳染性法氏囊病病毒Mouse NXF1 (Nuclear RNA Export Factor 1) Kit
化妝品 金黃色葡萄球(陽性)Mouse NUP35 (Nucleoporin 35kDa) Kit
葡萄座腔Mouse NUP37 (Nucleoporin 37kDa) Kit
產(chǎn)氣莢膜梭 毒素A型Mouse NUP50 (Nucleoporin 50kDa) Kit
多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細(xì)胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細(xì)胞表面,是 B 細(xì)胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
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