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人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書

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更新時間:2019-03-18 12:18:08瀏覽次數(shù):123次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書檢測目的:用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本..

公司人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。點擊了解更多人elisa kit。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書

 Human Hormone-sensitive lipase,HSL ELISA Kit

48T/96T

人激素敏感脂肪酶(HSL)Elisa KitHuman Hormone-sensitive lipase,HSL ELISA Kit
人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書【實驗用途】激素敏感脂肪酶(Hormone-sensitive lipase,HSL)是一種細(xì)胞內(nèi)的中性脂肪酶,能夠水解甘油三酯(TG)、甘油二酯(DG)、單?;视汀⒛懝檀减ヒ约捌渌|(zhì)和水溶性基質(zhì)。HSL水解TG和膽固醇酯底物的活性受可逆的磷酸化作用調(diào)控。HSL缺失小鼠的骨骼肌、肝臟脂肪組織的胰島素敏感性受到損害。脂肪甘油三酯脂肪酶(ATGL)與HSL共同促進(jìn)儲存于哺動物脂肪組織的TG的水解。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。


試劑配制:
1、人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項:
1加樣:
人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書實驗樣本過多時,可分批次操作,以減少實驗時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實驗室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
?現(xiàn)貨供應(yīng) 過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 過氧化物酶體增殖物激活受體δ(PPARδ)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 過氧化氫酶(CAT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 過氧蛋白同源物(PXDN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 封閉蛋白2(CLDN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 封閉蛋白2(CLDN2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 封閉蛋白20(CLDN20)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 封閉蛋白22(CLDN22)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 封閉蛋白23(CLDN23)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 封閉蛋白24(CLDN24)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 骨鈣素(OC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 補(bǔ)體成分5(C5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) S100鈣結(jié)合蛋白A7(S100A7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 轉(zhuǎn)鐵蛋白(TRF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 腦鈉素(BNP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法) 規(guī)格: 48T/96T
人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書pQE-9低溫運輸,-20℃保存pQE-9現(xiàn)貨供應(yīng)

pQE-Tirs低溫運輸,-20℃保存pQE-Tirs現(xiàn)貨供應(yīng)

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Prehybridization Solutions in SSC 常溫保存Prehybridization Solutions in SSC 現(xiàn)貨供應(yīng)

Prehybridization Solutions in SSPE 常溫保存Prehybridization Solutions in SSPE 現(xiàn)貨供應(yīng)

PreScissiom 蛋白酶-20℃保存PreScissiom Protease現(xiàn)貨供應(yīng)

pRetro-Off低溫運輸,-20℃保存pRetro-Off現(xiàn)貨供應(yīng)
操作步驟:
1)人激素敏感脂肪酶Elisa Kit說明書運用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。

 

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