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人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3Elisa Kit
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 是 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
公司人JUN MAPKElisa Kit說明書采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。點(diǎn)擊了解更多人elisa kit。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
人JUN MAPKElisa Kit說明書 | Human JUN MAPK ELISA Kit | 48T/96T |
人JUN MAPKElisa KitHuman JUN MAPK ELISA Kit
人JUN MAPKElisa Kit說明書【實(shí)驗(yàn)用途】研究發(fā)現(xiàn),用紫外線照射細(xì)胞后,一種蛋白激酶能夠磷酸化f—jun,其磷酸化位點(diǎn)位于c—jun氨基末端活性區(qū)Set63和Ser73,該蛋白激酶被稱為jun氨基末端激酶(jun N—terminal kinase,JNK)。JNK原來被稱為應(yīng)激激活的蛋白激酶(SAPK)。與其他MAPK一樣,當(dāng)酪氨酸和蘇氨酸殘基發(fā)生磷酸化后,JNK/SAPK也可被激活。JNK可以受各種各樣的細(xì)胞外刺激而激活,這些刺激包括生長因子、細(xì)胞因子和細(xì)胞應(yīng)激。細(xì)胞應(yīng)激又包括熱休克、脂多糖、腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素—1、高滲透壓、紫外線照射和缺血/再灌注損傷等。JNK的上游激酶包括兩個MAPKK:MKK4(SECl)和MKK7。MKK4、MKK7通過雙磷酸化JNK的蘇氨酸和酪氨酸位點(diǎn)而激活JNK,是JNK的特異性激酶。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
試劑配制:
1、人JUN MAPKElisa Kit說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事項(xiàng):
1加樣:
①人JUN MAPKElisa Kit說明書實(shí)驗(yàn)樣本過多時,可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時,使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時間的條件;
②用1個小溫度計放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時,拍板時要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時,反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
?現(xiàn)貨供應(yīng) 雙調(diào)蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 雙調(diào)蛋白B(AREGB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 雙解絲蛋白1(TWF1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 雙解絲蛋白2(TWF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 雙糖鏈蛋白聚糖(BGN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 層粘連蛋白α2(LAMα2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 層粘連蛋白β1(LAMβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 層粘連蛋白β1(LAMβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 層粘連蛋白β1(LAMβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 層粘連蛋白β1(LAMβ1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 層粘連蛋白β2(LAMβ2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 核糖核酸酶T2(RNASET2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) 調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) CD30配體(CD30L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) CD30配體(CD30L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
現(xiàn)貨供應(yīng) CD40配體(CD40L)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
人JUN MAPKElisa Kit說明書HCCC-9810細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCCC-9810現(xiàn)貨供應(yīng)
HCCLM3細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCCLM3現(xiàn)貨供應(yīng)
Hce-8693細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存Hce-8693現(xiàn)貨供應(yīng)
HCl Buffer,1.0M,pH6.5 常溫保存HCl Buffer,1.0M,pH6.5 現(xiàn)貨供應(yīng)
HCT-116細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCT-116現(xiàn)貨供應(yīng)
HCT-15細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCT-15現(xiàn)貨供應(yīng)
HCT-8/FU細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCT-8/FU現(xiàn)貨供應(yīng)
HCT-8/Taxol細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCT-8/Taxol現(xiàn)貨供應(yīng)
HCT-8/V細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCT-8/V現(xiàn)貨供應(yīng)
HCT-8細(xì)胞株低溫運(yùn)輸和保存HCT-8現(xiàn)貨供應(yīng)
HDAC抑制劑-20℃保存Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor現(xiàn)貨供應(yīng)
操作步驟:
1)人JUN MAPKElisa Kit說明書運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個樣品依據(jù)自個的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
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