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大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書

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更新時(shí)間:2019-03-14 12:35:13瀏覽次數(shù):163次

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產(chǎn)地 進(jìn)口 加工定制
適用領(lǐng)域 科研
樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時(shí)分裝標(biāo)號后,置-20℃或-70℃保存;3、請?zhí)崆案嬖V我們:大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書說明書樣本的種屬、樣本數(shù)量、待測指標(biāo)及其他特殊要求。

試劑配制:
1、大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

產(chǎn)品名稱

英文名稱

規(guī)格

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書

 Rat matrix metalloproteinases 13 /MMP-13 ELISA Kit

48T/96T

大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 (MMP-13)Elisa KitRat matrix metalloproteinases 13 /MMP-13 ELISA Kit
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書MMP-13(基質(zhì)金屬蛋白酶-13),為MMPs家族。基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)是一個(gè)高度保守且依賴于鋅離子的內(nèi)切蛋白水解酶家族,其中MMP-13屬于MMPs中的膠原酶亞家族,又稱為膠原酶3 (collagenase-3),可以降解細(xì)胞外基質(zhì)中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,Ⅴ型膠原和蛋白酶,因此MMP-13的表達(dá)增強(qiáng)有利于細(xì)胞外基質(zhì)降解,可能與惡性腫瘤浸潤,轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。

 


操作步驟:
1)大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書運(yùn)用前,將所有試劑充沛混勻。不要使液體發(fā)生很多的泡沫,防止加樣時(shí)參加很多的氣泡,發(fā)生加樣上的差錯。
2)依據(jù)待測樣品數(shù)量加上規(guī)范品的數(shù)量決議所需的板條數(shù)。每個(gè)規(guī)范品和空白孔主張做復(fù)孔。每個(gè)樣品依據(jù)自個(gè)的數(shù)量來定,能運(yùn)用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后參加50ul于反響孔內(nèi)。
3)參加稀釋好后的規(guī)范品50ul于反響孔、參加待測樣品50ul于反響孔內(nèi)。當(dāng)即參加50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,悄悄振動混勻,37℃溫育1小時(shí)。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
5)每孔參加80ul的親和鏈酶素-HRP,悄悄振動混勻,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗刷液,振動30秒,甩去洗刷液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。假如用洗板機(jī)洗刷,洗刷次數(shù)添加一次。
7)每孔參加底物A、B各50ul,悄悄振動混勻,37℃溫育10分鐘。防止光照。
8)取出酶標(biāo)板,敏捷參加50ul停止液,參加停止液后應(yīng)當(dāng)即測定成果。
9)在450nm波利益測定各孔的OD值。
注意事項(xiàng):
1加樣:
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書實(shí)驗(yàn)樣本過多時(shí),可分批次操作,以減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間延長造成的誤差;
②加酶試劑后,用吸水紙吸干孔外試劑;
③作定量試驗(yàn)時(shí),使用加樣器加注試劑,并經(jīng)常校正其準(zhǔn)確性,此外,要做到一份樣本一個(gè)移液頭,防止交叉污染。
2.溫育:
①如有兩種溫度,盡量使用較低的溫育溫度、較長反應(yīng)時(shí)間的條件;
②用1個(gè)小溫度計(jì)放置在板孔反應(yīng)液中測量觀察;
③96孔板周圍孔與中心孔在溫育中的熱力學(xué)梯度會造成“邊緣效應(yīng)”,因此盡量采用水??;
3.洗板:
①手工洗板時(shí),拍板時(shí)要垂直,避免交叉污染,用力不能過猛,防止抗原抗體復(fù)合物脫離;
②洗板機(jī)洗板時(shí)應(yīng)經(jīng)常檢查沖洗頭是否通暢,若被雜物堵塞時(shí)可用注射器針頭挑出;
③為了洗滌效果好,實(shí)驗(yàn)室可采用機(jī)器與人工洗滌相結(jié)合的方法,在機(jī)器洗滌后再進(jìn)行人工洗板1-2次,或適當(dāng)增加洗板的次數(shù);
4.顯色:
ELISA試劑盒中,如以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物,則提供的底物為A和B兩瓶應(yīng)用液;如以鄰苯二胺(OPD)為底物,則試劑盒提供鄰苯二胺片劑或粉劑。顯色反應(yīng)條件為37℃或室溫反應(yīng)15-30 min。以鄰苯二胺(OPD)為底物的試劑,要臨用前30 min配制且必須避光。以四甲基聯(lián)苯胺(TMB)為底物的試劑則不需避光,但A、B液應(yīng)盡量避免接觸金屬器械。
5.判定:
讀取結(jié)果要在15-30 min內(nèi)完成,定性測定用肉眼判讀試驗(yàn)結(jié)果時(shí),反應(yīng)板應(yīng)水平距離白色背景10-15 cm;定量測定時(shí)用酶標(biāo)儀讀取結(jié)果,酶標(biāo)儀不應(yīng)置于陽光或強(qiáng)光照射下,需先預(yù)熱15-30 min再進(jìn)行測試。
公司大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書采用的全是進(jìn)口原材料研,發(fā)靈敏性高,高效性,*抗體,吸附均勻、吸附性好,回收利用率高、可靠性強(qiáng),無效包退包換,公司提供免費(fèi)代測服務(wù),各種種屬ELISA試劑盒產(chǎn)品齊全,質(zhì)量可靠。點(diǎn)擊了解更多大鼠elisa kit。
?現(xiàn)貨供應(yīng) GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

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現(xiàn)貨供應(yīng) 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶5(ADAMTS5)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶7(ADAMTS7)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

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現(xiàn)貨供應(yīng) 血小板反應(yīng)蛋白解整合素金屬肽酶9(ADAMTS9)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 中間密度脂蛋白(IDL)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 胎盤鈣黏蛋白(CDHP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) α2-巨球蛋白(α2M)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) α-乳清蛋白(αLA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T

現(xiàn)貨供應(yīng) 血管生成素樣蛋白4(ANGPTL4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶-13 Elisa Kit說明書Doxorubicin hydrochloride 鹽酸阿霉素25316-40-920mg

10ml離心管(圓底連蓋)200支包

暗盒8×10盒

Penicillin G potassium salt 青霉素G鉀鹽1MU瓶

10×PBS (pH7.2-7.4)500ml瓶

PBS干粉 (pH7.2-7.4 0.01M)2L包

Matrigel Matrix Hesc-qualified(基底膠)5ml瓶

Matrigel(基底膠)GFR,低生長因子10ml瓶

索萊寶單道移液器 100-1000ul100-1000ul支

Salidroside 紅景天苷10338-51-920mg

Lathyrol 千金子二萜醇34420-19-420mg

Dihydrocapsaicin 二氫辣椒堿19408-84-520mg

L-Abrine 相思豆毒素526-31-820mg

Chalcone 查爾酮94-41-720mg

S-(-)-Carbidopa 卡比多巴38821-49-720mg

細(xì)胞過濾篩(不銹鋼)800目個(gè)

25cm2正方斜口不透氣培養(yǎng)瓶20個(gè)包

Glimepiride 格列美脲1g瓶

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