免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標本片上，十分鐘后棄去，使標本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標記的抗體溶液，使其*覆蓋標本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
WBP11 aibody70 kDa Q9Y2W2Human, Mouse, Rat

WBP2 aibody28 kDa, observed 28 kDa,40 kDa Q969T9Human, Mouse, Rat

WBP2NL aibody28 kDa Q6ICG8Human, Mouse

WBS15/LAT2 aibody27 kDa, observed 27 kDa,14 kDa Q9GZY6Human, Mouse

WBSCR16 aibody50 kDa Q96I51Human, Mouse, Rat

WBSCR17 aibody68 kDa Q6IS24Human, Mouse, Rat

WDFY3 aibodyQ8IZQ1Human, Mouse, Rat

膜相關(guān)環(huán)指蛋白3抗體別 名 E3 ubiquitin-protein ligase MARCH3; FLJ20096; MARCH-III; March3; MARH3_HUMAN; Membrane associated ring finger (C3HC4) 3; Membrane-associated RING finger protein 3; Membrane-associated RING-CH protein III; RING finger protein 173; RNF173.

膜相關(guān)環(huán)指蛋白7抗體別 名 AXO; AXOT; Axotrophin; E3 ubiquitin-protein ligase MARCH7; MARCH VII; MARCH-VII; March7; MARH7_HUMAN; Membrane associated RING CH protein VII; Membrane associated ring finger (C3HC4) 7 E3 ubiquitin protein ligase; membrane associated ring finger C3HC4 7; Membrane associated RING finger protein 7; Membrane-associated RING finger protein 7; Membrane-associated RING-CH protein VII; RING finger protein 177; RNF177.

膜相關(guān)環(huán)指蛋白8抗體別 名 c MIR; c-MIR; Clular modulator of immune recognition; E3 ubiquitin protein ligase MARCH8; E3 ubiquitin-protein ligase MARCH8; MARCH 8; MARCH VIII; MARCH-VIII; MARCH8; MARH8_HUMAN; Membrane associated RING CH protein VIII; Membrane associated ring finger (C3HC4) 8; Membrane associated RING finger protein 8; Membrane-associated RING finger protein 8; Membrane-associated RING-CH protein VIII; MIR; RING finger protein 178; RNF178.
19號染色體開放閱讀框71抗體Aspergillus│niger提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no產(chǎn)檸檬酸。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 35℃礦物油法

Rhizopus│oryzae提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no糖化活力強，小曲酒糖化用，制葡萄糖。培養(yǎng)基: 0091生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Planomicrobium psychrophilum (Reddy et al. 2002) Dai et al. 2005分離基物: cyanobacterial mat sample提供形式: Freeze Dried安全等級: 1模式株: 未知生長條件: 25°C

Pseudomonas│sp.分離基物: 污泥提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no高溫；能夠水解支鏈粉；培養(yǎng)溫度70℃培養(yǎng)基: 0033生長條件: 30℃-80℃冰箱凍結(jié)法；定期移植法

Zygosaccharomyces│rouxii提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no釀造醬油。培養(yǎng)基: CM0013生長條件: 25℃真空冷凍干燥法

Brevibacillus│laterosporus提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 577生長條件: 28℃真空冷凍干燥法

Escherichia│coli分離基物: 病料提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2模式株: no研究，分析培養(yǎng)基: 335生長條件: 37

Cytospora│chrysosperma (Pers.) Fr.分離基物: 楊樹干部提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no植物病原物，用于該種群遺傳學(xué)研究；為該病防治提供依據(jù)培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法

Acremonium│sp.分離基物: 土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no活性物質(zhì)，卡斯帕酶3抑制活性培養(yǎng)基: CM0038生長條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)