當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>蛋白質(zhì)研究>> RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應(yīng)注意哪些問題?
答:RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣當(dāng)DNA 段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣的詳細(xì)介紹:
DNA提取流程圖:
?公司RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更蛋白質(zhì)研究。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
注意事項(xiàng):
● RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴(yán)格按照操作步驟操作。
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞3-羥-3-甲戊二酰輔酶AHMG-COA還原酶活性直接比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞乙醛脫氫酶3活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 血液乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 組織乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞乙醛脫氫酶2活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 血液乙醛脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 血液乙醛脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 組織乙醛脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞乙醛脫氫酶總活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)菌異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 組織異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞異檸檬酸脫氫酶活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 組織多聚ADP核糖聚合酶-PARP-活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞多聚ADP核糖聚合酶-PARP-活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 組織醛縮酶ADOLASE活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞醛縮酶ADOLASE活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 組織血紅素氧合酶-HEMEOXYGENASE-活性比色法定量檢測試劑盒
免疫測定 現(xiàn)貨供應(yīng) 細(xì)胞血紅素氧合酶-HEMEOXYGENASE-活性比色法定量檢測試劑盒
RIPA 裂解液 ( 中 )100mL哪里有賣大鼠肺泡巨噬細(xì)胞,NR8383細(xì)胞
大鼠肝癌細(xì)胞,RH-35細(xì)胞
大鼠肝細(xì)胞,BRL-3A細(xì)胞
大鼠肝星形細(xì)胞,CFSC-8B細(xì)胞
大鼠回腸細(xì)胞,IEC-18細(xì)胞
大鼠腦I型星形膠質(zhì)細(xì)胞,CTX-TNA細(xì)胞
大鼠腦間質(zhì)細(xì)胞,DI TNC1細(xì)胞
大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞,C6細(xì)胞
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