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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>PCR相關(guān)試劑>>蛋白相關(guān)>> Super ECL Substrate
產(chǎn)地 | 國(guó)產(chǎn) | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品分類 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
Super ECL Substrate | 蛋白相關(guān) | 50 ml 500ml | BJ-PJ6662 |
超敏 ECL 顯色液用于 Western、Northern 和 Southernblot 分子雜交的化學(xué)發(fā)光檢測(cè),比傳統(tǒng)化學(xué)顯色法靈敏度高,可達(dá) pg 水平。原理是采用新型發(fā)光底物(Luminol),其與辣根過(guò)氧化物酶反應(yīng)時(shí)產(chǎn)生很強(qiáng)的發(fā)光信號(hào),在暗室中對(duì)X-光片感光,以此檢測(cè)微量蛋白而獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。?;鰪?qiáng)型 ECL 顯色液具有靈敏度高,持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)。
應(yīng)用
在 Western 印跡分析,核酸雜交以及 EMSA 實(shí)驗(yàn)中,HRP標(biāo)記的二抗或探針與靶分子結(jié)合再與底物反應(yīng)產(chǎn)生可見(jiàn)光。
儲(chǔ)存:2-8°C,Super ECL A 要求避光保存。
操作方法(以 Western Blot 為例)
1.按每平方厘米膜面積用 0.1-0.2 ml 配置顯色液:根據(jù)顯色液的需要量,取等體積 A 液和 B 液,混勻后避光保存?zhèn)溆?;該顯色液必須現(xiàn)配現(xiàn)用。
2.2. 取出膜,平放在干凈的保鮮膜上,膜的正面(蛋白質(zhì)面)朝上,在膜的中央加適量的配置好的顯色液(6×8 cm 的膜加 2 ml 顯色液),溶液向四周迅速擴(kuò)散,覆蓋所有膜面。室溫保溫 5 分鐘左右,在此過(guò)程中請(qǐng)仔細(xì)觀察信號(hào)的出現(xiàn)。注意:如果信號(hào)強(qiáng),在暗室中能很快看到陽(yáng)性信號(hào)出現(xiàn)。
3.3. 待信號(hào)出現(xiàn)且穩(wěn)定后,用鑷子夾起膜,除去多余的顯色液,平放在干凈的保鮮膜上,膜的正面(蛋白質(zhì)面)朝上,在轉(zhuǎn)移膜的上面再覆蓋一層保鮮膜,除去保鮮膜與轉(zhuǎn)移膜之間的空氣泡,請(qǐng)務(wù)必保證保鮮膜是干凈的,不被其他雜物或液體污染。
4.4. 在暗室中,將膜的正面對(duì)著 X-光片,放入暗盒。第一次曝光時(shí)間在 1 分鐘左右(有經(jīng)驗(yàn)的操作者可以根據(jù)信號(hào)的強(qiáng)弱自行決定),立即按要求對(duì) X-光片進(jìn)行顯影和定影,確定最佳曝光時(shí)間。曝光時(shí)間從數(shù)秒到數(shù)小時(shí)不等;特別弱的過(guò)夜曝光也可。
注意
1.PVDF 膜較硝酸纖維膜能更好的結(jié)合蛋白,因此呈現(xiàn)較強(qiáng)的信號(hào)。選高質(zhì)量的 PVDF 膜;盡可能不用 Nylon 膜。
2.2.與抗體結(jié)合以后,要保證膜處于濕潤(rùn)狀態(tài),否則會(huì)導(dǎo)致背景較高。
3.3.沒(méi)有信號(hào)的原因:有些抗體不識(shí)別變性抗原,有時(shí)需要考慮電泳過(guò)程對(duì)蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的影響;樣品中無(wú)待測(cè)蛋白質(zhì)或含量過(guò)低;一抗效價(jià)低,用量少,可適當(dāng)增加一抗的用量;
4.4.背景過(guò)高原因:轉(zhuǎn)移膜封閉不充分;與抗體孵育后洗滌;膜在處理過(guò)程中過(guò)干;二抗用量過(guò)多等。
5.5.注意及時(shí)更換顯影液、定影液。
下列是公司正在出售的產(chǎn)品:
鋅指蛋白445抗體 英文名;Zinc finger protein 445 | 纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白抗體 英文名;FGFBP1 |
白介素-1受體拮抗劑抗體 英文名;IL-1RA | T淋巴細(xì)胞白血病同源蛋白2抗體 英文名;TLX2 |
DHX34蛋白抗體 | 磷酸二羥丙酮酰基轉(zhuǎn)移酶抗體 |
磷酸化接頭蛋白Gab 2抗體 英文名;phospho-GAB2 (Tyr452) | A型鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白4抗體 |
DHX33蛋白抗體 英文名;DHX33 | 類固醇5α還原酶1抗體 英文名;SRD5A1 |
硒蛋白SECIS結(jié)合蛋白2抗體 英文名;SECISBP2 | A激酶錨定蛋白5抗體 英文名;AKAP5 |
RNA結(jié)合蛋白43抗體 英文名;RBM43 | 碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移酶7抗體 英文名;CHST7 |
緊密連接蛋白/小分子膠原蛋白OCEL1抗體 | PerCP標(biāo)記人CD61單克隆抗體 英文名;human CD61/PerCP |
AF647標(biāo)記人CD25單克隆抗體 | 肌細(xì)胞特異性增強(qiáng)因子2D抗體 |
膠質(zhì)細(xì)胞系源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子受體α2抗體 英文名;GDNF Receptor alpha 2 | 20號(hào)染色體開放閱讀框201抗體 |
AF647標(biāo)記人CD16單克隆抗體 英文名;human CD16/AF647 | 肌管素相關(guān)蛋白2抗體 英文名;MTMR2 |
線粒體核糖體蛋白S17抗體 | 20號(hào)染色體開放閱讀框19抗體 英文名;C20orf19 |
鋅指蛋白686抗體 | Super ECL Substrate磷酸化神經(jīng)突觸素1抗體 |
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