當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸擴增>> 核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌
產(chǎn)地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
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適用領域 | 科研 |
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應注意哪些問題?
答:核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌當DNA 段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌的詳細介紹:
DNA提取流程圖:
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公司核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產(chǎn)品:點擊了解更核酸擴增。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴增系列產(chǎn)品
6、克隆表達系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細胞生物學研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
實驗步驟:
(1)核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
注意事項:
● 核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。
香酸(標準品) Syringic acid 530-57-4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
香醛(>98%,BP) Syringaldehyde 134-96-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BP
香酚(標準品) Eugenol 97-53-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
酰肼(B9)(標準品) Daminozide 1596-84-5 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品
烯基酞(標準品) 3-Butylidenephthalide 551-08-6 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品川芎提取,液體
基伊曲康唑 Butyl Itraconazole 89848-51-1 質(zhì)量規(guī)格:美國進口
基鄰二酰羥酸酯(>95.0%(GC)) Butyl Phthalyl Butyl Glycolate 85-70-1 質(zhì)量規(guī)格:>95.0%(GC)
二酰亞(>98%,BR) Succinimide 123-56-8 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
二酮肟(鎳試劑) Dimethylglyoxime 95-45-4 質(zhì)量規(guī)格:AR
二酸(AR) Sodium succinate 150-90-3 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
二酸洛沙平(標準品) Loxapine succinate salt 27833-64-3 質(zhì)量規(guī)格:含量測定
二酸酐(>98%,BR) Succinic anhydride 108-30-5 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
二酸二酯(>99%,BR) Dimethyl succinate 106-65-0 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
二酸銨(>98%,BR) Ammonium succinate 2226-88-2 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
草標準溶液(10μg/ml,u=7%) Butachlor solution 23184-66-9 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=7%
草標準溶液(100μg/ml,u=4%) Butachlor solution 23184-66-9 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=4%
草標準溶液(0.100mg/ml) Butachlor solution 23184-66-9 質(zhì)量規(guī)格:0.100mg/ml
草(標準品) Butachlor 23184-66-9 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,95%
威(標準品) Fenobucarb 3766-81-2 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,99%
核苷酸類似物法易錯 PCR 試劑盒15 次品牌Candesartan規(guī)格:>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Canagliflozinhemihydrate規(guī)格:>98%,高效的選擇性亞型2-葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(SGLT2)抑制劑
Canagliflozin規(guī)格:>95%,高效的選擇性亞型2-葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白(SGLT2)抑制劑
Canadabalsam規(guī)格:商品級
Camptothecin規(guī)格:>99%,喜樹提取
Camptothecin規(guī)格:HPLC≥99%,標準品
Camphor規(guī)格:HPLC≥96%,標準品
cAMP規(guī)格:>98%,BR
cAMP規(guī)格:>98%,標準品
Calycosin-7-O-β-D-glucoside規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
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