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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸擴(kuò)增>> 即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
公司即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更核酸擴(kuò)增。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測(cè)系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢的詳細(xì)介紹:
DNA提取流程圖:
?問:常用的DNA 濃度及純度檢測(cè)方法有哪些?
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對(duì)比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測(cè)OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長(zhǎng)片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢當(dāng)DNA 段長(zhǎng)度較長(zhǎng)(5 kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
2 由于長(zhǎng)段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對(duì)長(zhǎng)段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長(zhǎng)時(shí)間暴露在紫外等下。
注意事項(xiàng):
● 即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長(zhǎng)電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。
二辣椒堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydrocapsaicin 19408-84-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
二睪酮,雄諾龍 Stanolone/Androstanolone 521-18-6 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR
二非諾貝特 Dihydro Fenofibrate 61001-99-8 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
二多奈哌齊(非對(duì)映異構(gòu)體混合物) Dihydro Donepezil (Mixture of Diastereomers) 120012-04-6 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
二丹參酮I(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydrotanshinone I 87205-99-0 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
二丹參酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Dihydrotanshinone 20958-18-3 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥98%
二-D-赤-鞘氨醇 Dihydro-D-erythro-Sphingosine 764-22-7 質(zhì)量規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
二羥茶堿(標(biāo)準(zhǔn)品) Diprophylline 479-18-5 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定
二萘嵌(>98.0%(GC)) Perylene 198-55-0 質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(GC)
二茂鐵酸(>97.0%(GC)) Ferroceneacetic Acid 1287-16-7 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(GC)
二茂鐵 Ferrocene 102-54-5 質(zhì)量規(guī)格:>98%
二酞菁錫(IV) Tin(IV) Phthalocyanine Dichloride 18253-54-8 質(zhì)量規(guī)格:
二二茂鋯(>97.0%(T)) Zirconocene Dichloride 1291-32-3 質(zhì)量規(guī)格:>97.0%(T)
二蘇糖醇(DTT) DL-Dithiothreitol 578517 質(zhì)量規(guī)格:>99%,分子生物學(xué)級(jí)
二化四基秋蘭姆 Disulfiram 97-77-8 質(zhì)量規(guī)格:>97%
二化鉬(>98%,BR) Molybdenium(IV) sulfide 1317-33-5 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
二代酰(>98%,BR) Dithiooxamide 79-40-3 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
二赤蘚醇(DTE);1,4-二代赤蘚醇 1,4-Dithioerythritol 6892-68-8 質(zhì)量規(guī)格:>99%,進(jìn)分sigma
二磷酸組;磷酸組 Histamine phosphate 51-74-1 質(zhì)量規(guī)格:>98%,USP,BR
即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢Caspase3Substrate1m(Apopain),fluorogenic;Ac-DEVD-AMC規(guī)格:>95%,BR
Caspase1Substrate2m(ICE),fluorogenic;Ac-YVAD-AMC規(guī)格:>95%,BR
Casein規(guī)格:BR
,ChromeazurolS規(guī)格:IndGrade
Carvedilol-methyl-d3規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
Carvedilolβ-D-Glucuronide(mixtureofdiasteromers)規(guī)格:美國(guó)進(jìn)口
Carvedilol規(guī)格:>99%,EP
Carvedilol規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Carthamine;SafflowerYellow規(guī)格:色價(jià)E(1%)=150;紅花黃色素含量>95%
Carrageenan規(guī)格:粘度≥0.005pa.s
實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)即用型 PCR 試劑盒 2.0 1 mL多少錢實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測(cè)RNA的質(zhì)量
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