當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸擴(kuò)增>> 可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 否 |
---|---|---|---|
適用領(lǐng)域 | 科研 |
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書的詳細(xì)介紹:
DNA提取流程圖:
?公司可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更核酸擴(kuò)增。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書當(dāng)DNA 段長度較長(5 kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長時(shí)間暴露在紫外等下。
注意事項(xiàng):
● 可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書溶液PE *次使用前請按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當(dāng)延長電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴(yán)格按照操作步驟操作。
反油酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Elaidic acid 112-79-8 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)
反式玉米素葡萄糖苷 trans-Zeatin glucoside 51255-96-0 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式玉米素 trans-Zeatin 1637-39-4 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
反式伊曲康唑 trans Itraconazole 252964-65-1 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式-鹽酸玉米素 trans-Zeatin hydrochloride 6025-81-6 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式-羧基格列美脲 trans-Carboxy Glimepiride 127554-90-9 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式肉桂醛(>95%,BR) trans-Cinnamaldehyde 14371-10-9 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
反式拉坦前列素 trans Latanoprost 913258-34-1 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式茴香腦(標(biāo)準(zhǔn)品) cis-Anethol 104-46-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
反式烯醛(standard for GC) (E)-2-Butenal 123-73-9 質(zhì)量規(guī)格:standard for GC
反式白藜蘆醇-4'-酸鹽 trans Resveratrol-4'-sulfate 858187-19-6 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式白藜蘆醇4'-O-β-D-葡萄糖苷酸 trans Resveratrol 4'-O-β-D-Glucuronide 387372-20-5 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式白藜蘆醇3-O-β-D-葡萄糖苷酸 trans Resveratrol 3-O-β-D-Glucuronide 387372-17-0 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式白藜蘆醇-3,5-酸鹽 trans Resveratrol-3,5-disulfate 858187-21-0 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反式-9-十八烯酸酯(標(biāo)準(zhǔn)品) trans-9-Octadecenoic methyl ester 2462-84-2 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
反式(2,3)-二那嗪 trans (2,3)-Dihydro Tetrabenazine 3466-75-9 質(zhì)量規(guī)格:美國進(jìn)口
反-肉桂酸膽固醇酯(>96.0%(HPLC)(T)) Cholesterol trans-Cinnamate 50305-81-2 質(zhì)量規(guī)格:>96.0%(HPLC)(T)
反鉑 transplatin 14913-33-8 質(zhì)量規(guī)格:>95%
反環(huán)鹽酸鹽;單氧化酶(MAO)抑制劑 Tranylcypromine (2-PCPA) HCl 1986-47-6 質(zhì)量規(guī)格:>97%,單氧化酶(MAO)抑制劑
可逆型 Taq DNA 聚合酶抑制劑0.3mL說明書CefotaximeSodium規(guī)格:效價(jià)測定
Cefoperazonesodium規(guī)格:870μg-1015μg/mg,USP,BR
Cefoperazonesodium規(guī)格:效價(jià)測定
CefoperazoneAcid規(guī)格:>98%,BR
CefoperazoneAcid規(guī)格:含量測定
Cefodizimesodium規(guī)格:>90%,BR
Cefodizimeacid規(guī)格:>90%,BR
Cefmenoximehydrochloride規(guī)格:Cefmenoxime≥93%,BR
Cefixime規(guī)格:>98%,BR
Cefixime規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
請輸入賬號
請輸入密碼
請輸驗(yàn)證碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé),儀表網(wǎng)對此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風(fēng)險(xiǎn),建議您在購買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。