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當(dāng)前位置:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>探針標(biāo)記及檢測>> 定影粉1袋品牌
產(chǎn)地 | 進(jìn)口 | 加工定制 | 否 |
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適用領(lǐng)域 | 科研 |
問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
定影粉1袋品牌稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對(duì)比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時(shí)不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會(huì)偏低,因?yàn)閜H 值和離子存在會(huì)影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時(shí)應(yīng)注意哪些問題?
答:定影粉1袋品牌當(dāng)DNA 段長度較長(5 kb 以上)時(shí),回收效率會(huì)有所下降,這是DNA 切膠回收時(shí)的常見現(xiàn)象。此時(shí)建議按以下方法解決問題:
1 適當(dāng)增加待回收DNA 樣品的點(diǎn)樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對(duì)長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時(shí)不要將DNA 長時(shí)間暴露在紫外等下。
定影粉1袋品牌的詳細(xì)介紹:
DNA提取流程圖:
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公司定影粉1袋品牌的RNA/DNA提取目錄有下面10個(gè)系列,5000余種產(chǎn)品:點(diǎn)擊了解更探針標(biāo)記及檢測。
1、RNA純化系列產(chǎn)品
2、DNA純化系列產(chǎn)品
3、電泳及回收系列產(chǎn)品
4、探針標(biāo)記及檢測系列產(chǎn)品
5、核酸擴(kuò)增系列產(chǎn)品
6、克隆表達(dá)系列產(chǎn)品
7、基因組研究系列產(chǎn)品
8、蛋白質(zhì)研究系列產(chǎn)品
9、細(xì)胞生物學(xué)研究系列產(chǎn)品
10、即用型溶液、質(zhì)粒庫、菌種庫等等
實(shí)驗(yàn)步驟:
(1)定影粉1袋品牌實(shí)驗(yàn)開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細(xì)粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)掃描檢測RNA的質(zhì)量
注意事項(xiàng):
● 定影粉1袋品牌溶液PE *次使用前請(qǐng)按瓶上標(biāo)簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產(chǎn)品對(duì)電泳使用的Agarose 種類沒有嚴(yán)格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質(zhì)量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點(diǎn)的Agarose 等。
● 電泳時(shí)請(qǐng)使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請(qǐng)適當(dāng)延長電泳時(shí)間,在條帶分離清晰后進(jìn)行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時(shí)應(yīng)盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強(qiáng)。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會(huì)偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應(yīng)等,不會(huì)影響后續(xù)試驗(yàn)。
● 為了保證回收效率,請(qǐng)不要使用未調(diào)整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請(qǐng)嚴(yán)格按照操作步驟操作。
降鈣素基因相關(guān)肽(8-37),人 Calcitonin Gene Related Peptide (8-37), human 119911-68-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
降鈣素;醋酸鮭魚降鈣素 Salcitonin Acetate(Salmon Calcitonin) 47931-85-1 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
降鈣素,人 Calcitonin, human 21215-62-3 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
降鈣素,大鼠 Calcitonin, rat 111108-25-5 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
降二辣椒堿 Nordihydrocapsaicin 28789-35-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥95%,標(biāo)準(zhǔn)品
姜酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Zingerone 122-48-5 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
姜酮(標(biāo)準(zhǔn)品) Zingerone 122-48-5 質(zhì)量規(guī)格:GC≥98%,進(jìn)口分裝
姜黃素(高純) Curcumin 458-37-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,BR
姜黃素(標(biāo)準(zhǔn)品) Curcumin 458-37-7 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
姜黃素 Curcumin 458-37-7 質(zhì)量規(guī)格:姜黃素類化合物>95%,姜黃素>75%,去氧基姜黃素<20%
健那綠B Janus Green B 2869-83-2 質(zhì)量規(guī)格:BS
劍麻皂苷元(標(biāo)準(zhǔn)品) Tigogenin 77-60-1 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
堿性氧化鋁(>90%,BC) Aluminum oxide, active 1344-28-1 質(zhì)量規(guī)格:Al2O3>90%,BC
堿性品紅(生物染色級(jí)) Basic Fuchsin 632-99-5 質(zhì)量規(guī)格:BS(生物染色級(jí))
堿性品紅(分析標(biāo)準(zhǔn)品) Basic Fuchsin 632-99-5 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品
堿性成纖維生長因子 bFGF (119 - 126), BasicFibroblast Growth Factor,human, bovin 62031-54-3 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
堿式酸鋁(>50%,BR) Aluminum acetate, basic 142-03-0 質(zhì)量規(guī)格:>50%,BR
堿式碳酸鋅 Zinc carbonate basic 1228348 質(zhì)量規(guī)格:BR
堿式碳酸銅(銅純度:52.5~56.5%) Copper(II) carbonate basic 12069-69-1 質(zhì)量規(guī)格:純度(銅):52.5~56.5%
定影粉1袋品牌CYPROHEPTADINEHYDROCHLORIDE規(guī)格:HPLC法含量測定
Cynaroside規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Cynarin規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
Cyclovirobuxine規(guī)格:滴定法≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
CyclosporineA規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)
CyclosporineA規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
CyclosporinD規(guī)格:>95%
Cyclophosphamide規(guī)格:>98%,一水合物USP,BR
Cyclophosphamide規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品
Cyclopenthiazide規(guī)格:含量測定
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