當前位置:上海邦景實業(yè)有限公司>>RNA/DNA提取>>核酸電泳及回收>> 柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌
產地 | 進口 | 加工定制 | 否 |
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適用領域 | 科研 |
公司柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌的RNA/DNA提取目錄有下面10個系列,5000余種產品:點擊了解更核酸電泳及回收。
1、RNA純化系列產品
2、DNA純化系列產品
3、電泳及回收系列產品
4、探針標記及檢測系列產品
5、核酸擴增系列產品
6、克隆表達系列產品
7、基因組研究系列產品
8、蛋白質研究系列產品
9、細胞生物學研究系列產品
10、即用型溶液、質粒庫、菌種庫等等
柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌的詳細介紹:
DNA提取流程圖:
?問:常用的DNA 濃度及純度檢測方法有哪些?
柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌稱答:回收得到的DNA段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。瓊脂糖凝膠電泳通過對比定量的Marker 來定量濃度;紫外分光檢測OD260/280 比值,OD260/280 比值在1.7-1.9 之間說明所得 DNA 純度較好,如果洗脫時不使用溶液Eluent而使用去離子水,比值會偏低,因為pH 值和離子存在會影響光吸收值,但不表示純度低。
問:長片段回收時應注意哪些問題?
答:柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌當DNA 段長度較長(5 kb 以上)時,回收效率會有所下降,這是DNA 切膠回收時的常見現(xiàn)象。此時建議按以下方法解決問題:
1 適當增加待回收DNA 樣品的點樣量;
2 由于長段DNA 不易從樹脂上洗脫下來,建議洗脫兩次,可以提高洗脫效率;
3 減少操作過程中對長段DNA 的物理損傷,如混合振蕩操作不要過于劇烈,切膠時不要將DNA 長時間暴露在紫外等下。
注意事項:
● 柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌溶液PE *次使用前請按瓶上標簽加入4 倍體積的無水乙醇,即15 ml 溶液PE 中加入60 ml 無水乙醇,20 ml 溶液PE 中加入80 ml 無水乙醇,使用后立即蓋緊蓋子。
● 本產品對電泳使用的Agarose 種類沒有嚴格限制,可以使用普通Agarose 。為了保證回收DNA 的質量和DNA 回收效率,希望使用高純度的Agarose ,但沒有必要一定要使用低熔點的Agarose 等。
● 電泳時請使用新鮮配制的TAE 電泳緩沖液,以免影響電泳及回收效果。
● 請適當延長電泳時間,在條帶分離清晰后進行切膠回收,以免回收到多余雜帶。
● 為提高DNA 回收收率,切膠時應盡量除去多余的膠塊。
● 本試劑盒純化柱的DNA 吸附能力強。但如果DNA 濃度小,或DNA 初始量少,回收率將會偏低。
● 溶液Eluent(10 mM Tris-HCl, pH 8.5)中不含EDTA,其收集的DNA段可直接用于各種酶促反應等,不會影響后續(xù)試驗。
● 為了保證回收效率,請不要使用未調整pH 值的超純水洗脫目的段。
● 請嚴格按照操作步驟操作。
水溶性四氮唑-4 GLT004 178925-54-7 質量規(guī)格:BR
水溶性四氮唑-3 GLT003 161617-45-4 質量規(guī)格:BR
水溶性四氮唑-1 GLT001 150849-52-8 質量規(guī)格:BR
水溶毛地黃皂苷 Digitonin-water-soluble 11024-24-1 質量規(guī)格:進分,BR
水晶蘭苷(標準品) Monotropein 5945-50-6 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
水合氧化前胡素 OXYPEUCEDANINHYDRATE 2643-85-8 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
水合硫酸鐵(> 99%,BR) Iron(III) sulfate, hydrate 15244-10-7 質量規(guī)格:> 99%,BR
水合紅菲繞啉二磺酸鈉水合物 Bathophenanthrolinedisulfonic Acid Disodium Salt Hydrate 53744-42-6 質量規(guī)格:用于亞鐵離子的測定
水飛薊素 Silymarin 65666-07-1 質量規(guī)格:水飛薊素UV 80%;雙賓30%
水飛薊素 Silymarin 65666-07-1 質量規(guī)格:水飛薊素UV 80%;單賓30%
水飛薊賓(標準品) Silibinin 22888-70-6 質量規(guī)格:HPLC>97%,標準品
水飛薊賓 Silibinin 22888-70-6 質量規(guī)格:>97%,BR
霜霉威(分析標準品,99%) Propamocarb 24579-73-5 質量規(guī)格:分析標準品,99%
雙乙酸鈉 Sodium diacetate 126-96-5 質量規(guī)格:>99%
雙(標準品) Dicoumarol 66-76-2 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
雙水楊酯;水楊酸-2-羧基苯酯 Sasapyrine 552-94-3 質量規(guī)格:>98%,BR
雙水楊酯 ;水楊酸-2-羧基苯酯 Sasapyrine 552-94-3 質量規(guī)格:>98%,BR
雙去氧基姜黃素(標準品) Bisdemethoxycurcumin 24939-16-0 質量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
雙去甲埃羅替尼醋酸鹽 Didesmethyl Erlotinib Hydrochloride Salt 183320-12-9 質量規(guī)格:美國進口
柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌Fluorescein-5-maleimide規(guī)格:HPLC>97.0%,進口
Fluoresceindisodiumsalt規(guī)格:BS
Fluoresceindisodiumsalt規(guī)格:含量測定
FluoresceinDiacetate規(guī)格:>98.0%(HPLC)
FluoresceinChloride規(guī)格:>90.0%(HPLC)
Fluorescein規(guī)格:IND
Fluorescein規(guī)格:AR,90%
Fluorescein規(guī)格:AR
Fluorescamine規(guī)格:>98%
Fluorene規(guī)格:StandardforGC,≥99%(HPLC)
實驗步驟:
(1)柱式 DNA 膠回收試劑盒50 次品牌實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預熱,離心管中加入ME(巰基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::(25:24:1)抽提兩次,:(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質量
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