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單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產生出的化學性質單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學性質單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
脫羧酶蛋白體36抗體 | CXorf36 | BJ-K7985 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關,骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘撸瑢㈦s交瘤細胞移植到小鼠腹腔內,從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當機體受到抗原刺激后, 產生免疫學反應,由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應、沉淀反應等優(yōu)點,產品僅用于科研被廣泛應用于免疫學診斷領域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調理作用和 ADCC 效應),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內受感染后早產生的抗體,具有很強的激活補體和調理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質的人血清中可檢測到,參與介導 I 型超敏反應和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應以清除病原微生物或導致病理損傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結合不同種的細胞,參與免疫應答。
(4)產品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質,也具有刺機體產生免疫應答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質凝固變性的物質,均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經透析法將其純化。
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(pH 7.9±0.1)神經元生長添加物肝動脈內皮細胞p-Arhgef2/GEF-H1(Rho guanine nucleotide exchange factor 2,pSer810) 磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗原
抗生素檢定培養(yǎng)基1號(pH 6.5-6.6)少突膠質前體細胞生長添加物肝動脈平滑肌細胞Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(pH 7.9±0.1)少突膠質細胞生長添加物肝星形細胞ARIP2a(Activin receptor 2A) 激活素受體2A/激活素受體相互作用蛋白2a抗原
抗生素檢定培養(yǎng)基2號(pH 6.5-6.6)少突膠質前體分化生長添加物肝竇內皮細胞Beta-arrestin 1/2(beta-arrestin 1/2) β-抑制蛋白1/2抗原
抗生素檢定培養(yǎng)基3號雪旺細胞生長添加物胃粘膜上皮細胞ARIP2B(Activin receptor 2B) 激活素受體2B/激活素受體相互作用蛋白2b
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)星形細胞生長添加物腎小球內皮細胞MTR-1A (Melatonin receptor-1A) 褪黑素受體(抗原)
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL)小膠質細胞生長添加物腎近曲管狀上皮細胞MTLC (c-Myc target from laryngeal cancer cells)又稱:MYC 致癌基因(抗原)
玫瑰紅鈉瓊脂巨噬細胞生長添加物腎皮層上皮細胞N-coR1 (Nuclear receptor co-repressor 1) 核受體輔助抑制因子(抗原)
OLFM1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、馬、雞嗅球蛋白1IgG周期素E1,1,2,2-氘代四氯乙烷Rat PKCB1 (Protein Kinase C Beta 1) 檢測試劑盒
GST-Tag/HRP 辣根過氧化物酶標記兔抗重組谷胱甘肽轉移酶GST標簽蛋白IgG7號染色體開放閱讀框501,1,2,2-氘代四氯乙烷Rat PKCD (Protein Kinase C Delta) 檢測試劑盒
FLAG Tag (NT)/HRP 辣根過氧化物酶標記FLAG Tag標簽(N端)IgG7號染色體開放閱讀框53異麥芽三糖Rat PKCE (Protein Kinase C Epsilon) 檢測試劑盒
GTP-CH-1/FITC 熒光素標記三磷酸鳥苷環(huán)水解酶IgG7號染色體開放閱讀框59異麥芽三糖Rat PKCG (Protein Kinase C Gamma) 檢測試劑盒
GTSE-1/FITC 熒光素標記G2期、S期應答相關蛋白1IgG7號染色體開放閱讀框643,5-二氯苯甲Rat PKCI (Protein Kinase C Iota) 檢測試劑盒
GZMA/FITC 熒光素標記顆粒酶AIgG8號染色體開放閱讀框123,5-二氯苯甲Rat PKCq (Protein Kinase C Theta) 檢測試劑盒
Granzyme D/B/E/N/G/F/H/FITC 熒光素標記顆粒酶D/B/E/N/G/F/HIgG8號染色體開放閱讀框31四丁基氫化銨Rat PKCZ (Protein Kinase C Zeta) 檢測試劑盒
A/H1N1-M2 Human/FITC 熒光素標記A型人流感病毒H1N1-M2IgG8號染色體開放閱讀框33四丁基氫化銨Rat PKC (Protein Kinase C)檢測試劑盒
脫羧酶蛋白體36抗體節(jié)桿Mouse PTHR2 (Parathyroid Hormone Receptor 2) Kit
枯草芽胞桿Mouse PTHrP (Parathyroid Hormone Rated Protein) Kit
釀酒酵母Mouse Pax (Paxillin) Kit
朱紅叢赤殼Mouse PDAP1 (PDGFA Associated Protein 1) Kit
長雙歧桿Mouse PTD (Pentosidine) Kit
小單孢Mouse PP (Pepsin) Kit
枯草芽孢桿Mouse PGA (Pepsinogen A) Kit
釀酒酵母Mouse PGC (Pepsinogen C) Kit
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