免疫熒光技術(shù)的實驗步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強度。
詳細介紹：

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抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進行誘導(dǎo)表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析，具有高效，特異性強，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價，而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
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抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補體結(jié)合點去激活補體系統(tǒng)、激發(fā)補體的溶菌、溶細胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
P-CK  廣譜細胞角蛋白PCK異環(huán)磷酰胺化合物Ⅲ3-羧基磺酸Human Ai-Surv (Ai-Survivin Aibody) 檢測試劑盒  

CK18  細胞角蛋白18鹽酸地匹福林3-羧基磺酸Human TA (Ai-Teichoic Acid Aibody) 檢測試劑盒

CK18  細胞角蛋白18（C端）鹽酸地匹福林前體3,4-二氨基甲Human AT (AiThrombin) 檢測試劑盒

CK18  細胞角蛋白18鹽酸貝那普利4-溴對三聯(lián)Human LIPH (Lipase H) 檢測試劑盒

CK14/17/42/10  細胞角蛋白14噴昔洛韋4-溴對三聯(lián)Human LTβR (Lymphotoxin Beta Receptor) 檢測試劑盒

CK15  細胞角蛋白15格列美脲雜質(zhì)1 （4-[2-(3-乙基-4-甲基-2-氧-3-吡咯啉-1-甲酰胺基）乙基]磺酰胺甲酸乙酯）5-氯氧化吲哚Human IGF-2 (Insulin Like Growth Factor 2) 檢測試劑盒

CK16  細胞角蛋白16鹽酸阿扎司瓊5-氯氧化吲哚Human ATGA/TGAB (Ai-Thyroid-Globulin Aibody) 檢測試劑盒

CK17  細胞角蛋白17鹽酸普萘洛爾Tris(6,6,7,7,8,8,8-heptafluoro-2,2-dimethyl-3,5-octanedionate)europium(III) hydrate,Eu(FOD)3Human TPO-Ab (Ai-Thyroid-Peroxidase Aibody) 檢測試劑盒

21號染色體開放閱讀框70Porcine ADCY1 (Adenylate Cyclase 1, Brain) 檢測試劑盒

胱抑素A/半胱氨酸蛋白酶抑制劑APorcine LAP (Leucine Aminopeptidase) 檢測試劑盒

8號染色體開放閱讀框4Porcine PARC/CCL18 (Pulmonary Activation Regulated Chemokine) 檢測試劑盒

CD73Porcine Ai-CIIAb (Ai-Type II Collagen Aibody) 檢測試劑盒  

軸突相關(guān)粘附分子Porcine P-GP (Permeability Glycoprotein) 檢測試劑盒

6型膠原蛋白α5Porcine P-CK (Pan-Cytokeratin) 檢測試劑盒

神經(jīng)細胞粘附分子CALLPorcine IL-2Rβ (Ierleukin 2 Receptor Beta) 檢測試劑盒

中性粒細胞殺菌蛋白BP30Porcine MT2 (Metallothionein 2) 檢測試劑盒
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白60抗體抗輻射鏈霉Rat FASL (Factor Rated Apoptosis Ligand)  Kit

哈茨木霉Rat F Ⅶ(Coagulation Factor Ⅶ)  Kit

松鼠葡萄球松鼠亞種Rat FⅧ (Coagulation Factor Ⅷ )  Kit

紅色紅曲霉Rat AQP-2 (Aquaporin 2)  Kit

根瘤Rat ApoC3 (Apolipoprotein C3)  Kit

大豆慢生根瘤Rat AGRN (Agrin)  Kit

黑腐皮殼Rat DPP4 (Dipeptidyl Peptidase IV)  Kit

中華根瘤Rat EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor)  Kit