客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA，設(shè)計(jì)并合成引物，完成熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)以及后續(xù)數(shù)據(jù)分析，提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告給您。

產(chǎn)品名稱：四甲基羅丹明-5(6)-馬來酰亞胺（混合物）

規(guī)格：25 mg

貨號(hào)：BJP1246

分類：熒光核酸試劑

產(chǎn)品僅用于科研儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。

運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

染料法

探針法　

可進(jìn)行相對，定量表達(dá)分析，定性分析，SNP檢測等

實(shí)驗(yàn)報(bào)告

·電泳圖   ·標(biāo)準(zhǔn)曲線 

·溶解曲線 ·擴(kuò)增曲線

·完整的實(shí)驗(yàn)過程、試劑、儀器及分析報(bào)告

儲(chǔ)存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時(shí)，熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時(shí)，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切，使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。

?

檢測步驟：

一、 試劑的準(zhǔn)備

從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振蕩混勻后，10000rpm離心10s。

設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照)，每個(gè)測試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量

熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL

酶混合物 1 µL N×1 µL

總量 15 µL N×15µL

（1） 計(jì)算好各試劑的使用量，加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中，充分混勻，10000rpm離心10s，向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液，向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬時(shí)離心10秒。

7.2 qPCR反應(yīng)條件

將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。

推薦循環(huán)條件:

1循環(huán) 50℃ for 2 min

預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min

PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec

60℃ for 60 sec

在60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán)：設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán)：NONE，請勿選擇ROX參比熒光。

虎紅實(shí)驗(yàn)步驟SignalSilence® FoxO3a siRNA I300 ul

藍(lán)（水溶）使用說明書SignalSilence® FoxO3a siRNA II300 ul

甲基紫6B價(jià)格SignalSilence® PARP siRNA I100 ul

4-硝基磷酸二鈉保存GAD1 (A9A5X) Rabbit mAb300 ul

保存SignalSilence® USP9X siRNA I300 ul

乙二醛縮雙（鄰氨基酚）使用說明書SignalSilence® RSK1 siRNA I300 ul

D-蟲熒光素鈉保存SignalSilence® eIF4E siRNA I100 ul

半二甲酚橙實(shí)驗(yàn)步驟Cleaved-IL-1β (Asp117) (E7V2A) Rabbit mAb (Mouse Specific)300 ul

可溶性淀粉價(jià)格SignalSilence® GSK-3α siRNA I300 ul

D-山梨醇實(shí)驗(yàn)步驟SignalSilence® RSK1 siRNA II300 ul

DL-α-酚醋酸酯使用說明書SignalSilence® PDK1 siRNA I300 ul

維生素B5實(shí)驗(yàn)步驟SignalSilence® Mcl-1 siRNA I300 ul

聚胞苷酸保存SignalSilence® Merlin siRNA I300 ul

2′-脫氧胸苷實(shí)驗(yàn)步驟SignalSilence® TAK1 siRNA I100 ul

鵝脫氧膽酸價(jià)格UBE2G2 (D8Z4G) Rabbit mAb300 ul

普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基保存SignalSilence® TAK1 siRNA II100 ul

柱式凍存血液 DNAout250 次多少錢Phospho-DRP1 (Ser637) (D3A4) Rabbit mAb300 ul
四甲基羅丹明-5(6)-馬來酰亞胺（混合物）馬紅球菌種屬: Rhodococcus equi凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；分析檢測。研究、質(zhì)量控制，《GB 4789.30-2010單核細(xì)胞增生李斯特氏菌檢驗(yàn)》陰性對照菌株。培養(yǎng)基: 腦心瓊脂 ：心提取物 5.0g，腦提取物 12.5g，月示 胨10.0g，葡萄糖 2.0g，NaCl 5.0g，Na2HPO4 2.5g，瓊脂15.0g，蒸餾水1.0L，pH7.4。生長條件: 37℃，兼性厭氧。生長特性: G+球菌，接觸酶陽性，尿素酶陽性，無動(dòng)力，生化反應(yīng)不活潑，不發(fā)酵任何糖類和醇類。兼性厭氧。存儲(chǔ)條件: -80℃冰箱凍結(jié)法；2-8℃，真空冷凍干燥法

Candida│gelidadi凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 釀造白酒和食醋。培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28-30℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法

Bacillus│vietnamensis分離基物: 土壤/水田土凍干物模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 微生物/土壤耐鹽菌培養(yǎng)基: 1001生長條件: 28℃存儲(chǔ)條件: 液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Enterococcus│faecalis斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: OOO6生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Alternaria│tenuissima (Kunze) Wiltshire分離基物: 蜀葵斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25存儲(chǔ)條件: 定期移植法

Influenzavirus A│Avian influenza virus分離基物: 病雞凍干物安全等級(jí): 4模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 研究培養(yǎng)基: 0生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Escherichia│coli凍干物安全等級(jí): 2模式菌株: no培養(yǎng)基: CM0051生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法

Listeria│innocua分離基物: 冷凍食品凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 用于科研培養(yǎng)基: 396生長條件: 37存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法;

Lactobacillus│sp.分離基物: 泡豬耳朵凍干物安全等級(jí): 1模式菌株: no應(yīng)用領(lǐng)域: 發(fā)酵制乳制品，生產(chǎn)青貯飼料，制作泡菜。培養(yǎng)基: CM0006生長條件: 37℃存儲(chǔ)條件: 真空冷凍干燥法；定期移植法
操作程序：

由您提供該實(shí)驗(yàn)中目的基因的相關(guān)資料（如：基因名稱、序列等信息），我們共同探討服務(wù)的可能性和技術(shù)路線；

商定服務(wù)收費(fèi)、付款方式、服務(wù)期限等，并簽定技術(shù)服務(wù)合同。

有您提供實(shí)驗(yàn)所需的足夠量的實(shí)驗(yàn)樣本（100mg組織或107個(gè)細(xì)胞），本公司不接受您提供的RNA樣本

PCR所需引物/探針（如果用探針法），可以由您自己提供，也可以委托本公司設(shè)計(jì)合成（費(fèi)用另計(jì)）。如果由您自己提供，必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉，本公司不接受已溶解的引物/探針。

我們進(jìn)行RNA抽提、RNA定量、反轉(zhuǎn)錄、Real-time PCR擴(kuò)增、數(shù)據(jù)分析。

產(chǎn)品僅用于科研提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括實(shí)驗(yàn)過程、所用儀器試劑、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)分析數(shù)據(jù)等。