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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
磷酸化腺瘤樣息肉抗體 | phospho-APC (Ser2054) | BJ-K6997 |
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單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用??贵w可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上??捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
CCL13/MCP-4/FITC 熒光素標記單核細胞趨化蛋白4IgGBCL7B蛋白2-(*硅基)乙Mouse U-T4 (Ultrasensitivity Thyroxine) 檢測試劑盒
CCL14/HCC-1/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白14IgG堿性核蛋白2(鋅指蛋白basonuclin2)2-(*硅基)乙Mouse U-T3 (Ultrasensitivity Triiodothyronine) 檢測試劑盒
CYLD/cylindromatosis 1/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠微管結(jié)合蛋白CYLDIgGB細胞白血病/淋巴瘤蛋白72-(*硅基)乙Mouse PLAU/uPA(Urokinase-Type Plasminogen Activator) 檢測試劑盒
phospho-CYLD(Ser418) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLDIgG先天性脂肪代謝障礙蛋白2(常染色體顯性遺傳痙攣性截癱17)4--4’-硝基聯(lián)Mouse Cr (Creatinine) 檢測試劑盒
CCL15/MIP5/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白15IgGB細胞遷移基因14--4’-硝基聯(lián)Mouse VEGF-B (Vascular Endothelial cell Growth Factor B) 檢測試劑盒
CCL16/HCC-4/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎性蛋白16IgG脊髓小腦共濟失調(diào)蛋白BEAN12,9-二氯-1,10-菲羅啉Mouse VEGF-C (Vascular Endothelial cell Growth Factor C) 檢測試劑盒
CCL17/TARC/FITC 熒光素標記胸腺活化調(diào)節(jié)趨化因子IgGB7H6蛋白2,9-二氯-1,10-菲羅啉Mouse VEGF-D (Vascular Endothelial cell Growth Factor D) 檢測試劑盒
ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標記抗嗜酸粒細胞趨化蛋白2IgGB細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子環(huán)丁Mouse VEGFR3/Flt4 (Vascular Endothelial Cell Growth Factor Receptor 3) 檢測試劑盒
DDC/FITC 熒光素標記多巴胺脫羧酶IgGC2CD4D蛋白2,8-二溴二并噻吩Rat EGR3 (Early Growth Response Protein 3) 檢測試劑盒
DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標記CD205IgG二硫鍵氧化還原酶鋅指蛋白51-異酸辛酯Rat GLUT1 (Glucose Transporter 1) 檢測試劑盒
Dectin-1/CLECSF12/FITC 熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員AIgGL-型電壓依賴型鈣通道β1-異酸辛酯Rat GLUT2 (Glucose Transporter 2)檢測試劑盒
Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC 熒光素標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員AIgG過氧化氫酶1-異酸辛酯Rat AChE (Acetylcholinesterase) 檢測試劑盒
Dectin-1/CLECSF12/RBITC 紅色熒光素羅丹明標記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員AIgG細胞色素P450 2C193-鄰二甲Rat MPIF2 (Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 2) 檢測試劑盒
DDX4/MVH/FITC 熒光素標記DDX4IgG心肌特異性肌鈣蛋白T3-鄰二甲Rat ELA4 (Elastase 4) 檢測試劑盒
Defensin Beta1/FITC 熒光素標記防御素β1IgGCD1613-鄰二甲Rat EMILIN 1 (Elastin Microfibril Ierface Located Protein 1) 檢測試劑盒
Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC 熒光素標記防御素β2IgG7號染色體開放閱讀框653,4-二甲基Rat ELOA (Elongin A) 檢測試劑盒
磷酸化腺瘤樣息肉抗體Ceratosphaeria│phyllostachydis Zhang分離基物: 枝桿提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 26-28定期移植法
Flammulina│velutipes var. velutipes (Curtis) Singer提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 14生長條件: 25定期移植法
Neosartorya│fischeri提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0015生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Rhizopus│stolonifer提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: 0014生長條件: 25-28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no抗HIV培養(yǎng)基: CM0027生長條件: 28C真空冷凍干燥
Rhodothermus│marinus分離基物: 水樣/上層溫泉水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no微生物/高溫(75℃)培養(yǎng)基: 471生長條件: 75℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Aspergillus│awamori提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0015生長條件: 28-30℃真空冷凍干燥法
Nematospora│coryli分離基物: 野生諾尼種子內(nèi)提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: no培養(yǎng)基: CM0077生長條件: 28℃-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
Ruania│sp.分離基物: 鹽堿土提供形式: 凍干物安全等級: 1模式株: yes培養(yǎng)基: 38生長條件: 37℃液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
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