免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

?
抗體的制備過程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存?？贵w一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
Phospho-Beta-Catenin (Ser33/37)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白格列喹酮2，5-二Human IGFBP-3 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 3) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-Beta-Catenin (Ser45)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白格列吡BOC-D-烯基甘氨酸Human IL-1α (Ierleukin 1 Alpha) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-Beta-Catenin (Ser552)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白4-[2-(5-甲基吡-2-甲酰氨基）乙基］磺酰胺BOC-D-烯基甘氨酸Human IL-1ra (Ierleukin 1 Receptor Aagonist) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-Beta-Catenin (Ser675)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白核黃素磷酸鈉甲基烯酰氧基三(*基硅氧烷基)硅烷Human IL-1R2 (Ierleukin 1 Receptor Type II) 檢測(cè)試劑盒

Phospho-Beta-Catenin (Thr41/Ser45)  磷酸化β 連環(huán)素蛋白吉非羅齊甲基烯酰氧基三(*基硅氧烷基)硅烷Human PSA/KLK3 (Prostate Specific Aigen) 檢測(cè)試劑盒

Cateninma gamma  gamma連環(huán)蛋白尿素甲基烯酰氧基三(*基硅氧烷基)硅烷Human FGF7 (Fibroblast Growth Factor 7) 檢測(cè)試劑盒

Cathepsin B  組織蛋白酶B高烏甲素4,6-三(3,5-二叔丁基-4-羥基芐基)Human LEPR (Leptin Receptor) 檢測(cè)試劑盒

DPP-I  組織蛋白酶C乳酸依沙吖啶4,6-三(3,5-二叔丁基-4-羥基芐基)Human LIF (Leukemia Inhibitory Factor) 檢測(cè)試劑盒

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶210-(1-萘基)蒽-9-酸Porcine PCPE1 (Procollagen C Proteinase Enhancer 1 ) 檢測(cè)試劑盒

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶22,4-二氯-5-硝基三氟甲Porcine CA153 (Carbohydrate Aigen 153) 檢測(cè)試劑盒

磷酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶22,4-二氯-5-硝基三氟甲Porcine PRSS8 (Protease, Serine 8) 檢測(cè)試劑盒

遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白4-溴-3-(三氟甲基)甲Porcine PDK4 (Pyruvate Dehydrogenase Kinase Isozyme 4) 檢測(cè)試劑盒

遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白樣4-溴-3-(三氟甲基)甲Porcine BCAN (Brevican) 檢測(cè)試劑盒

腺癌標(biāo)志物CHMP2A5-硝基-8-羥基喹啉Porcine TM (Thrombin) 檢測(cè)試劑盒

染色質(zhì)修飾蛋白CHMP65-硝基-8-羥基喹啉Porcine PACAPR (Pituitary Adenylate Cyclase Activating Polypeptide Receptor 1) 檢測(cè)試劑盒

染色質(zhì)修飾蛋白CHMP55-硝基-8-羥基喹啉Porcine KLK6 (Kallikrein 6) 檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞分裂核仁蛋白1抗體賈巴爾普爾毛殼Rat PDP (Pyruvate Dehydrogenase Phosphatase)  Kit

深綠木霉Rat PK (Pyruvate Kinase, Liver And RBC)  Kit

亞大韌革Rat M2-PK (Pyruvate Kinase,M2)  Kit

橘橙色動(dòng)球Rat GAP (Ras Gtpase Activating Protein)  Kit

香乳菇Rat NRG-2 (Neuregulin 2)  Kit

鉤狀木霉Rat RANκL (Receptor Activator of Nuclear Factor Kappa B Ligand)  Kit

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿Rat GHRL (Ghrin)  Kit

米根霉Rat REG1α (Regenerating Islet Derived Protein 1 Alpha)  Kit