免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實(shí)驗(yàn)步驟
1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其*覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過(guò)0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀(guān)察。觀(guān)察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
詳細(xì)介紹：

?
抗體的制備過(guò)程：
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白，通過(guò)分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對(duì)該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原，常見(jiàn)偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動(dòng)物
常用于制備抗血清的動(dòng)物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產(chǎn)時(shí)需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動(dòng)脈采血，家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血，家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化，利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析，具有高效，特異性強(qiáng)，純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對(duì)分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存。抗體一般比較穩(wěn)定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存約5年而不會(huì)影響效價(jià)，而真空干燥保存時(shí)間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
?
抗體的生活習(xí)性：
(1)結(jié)合特異性抗原：抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別，就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合，在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見(jiàn)的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)?？贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體：抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后，借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點(diǎn)去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞：不同類(lèi)別的免疫球蛋白，可結(jié)合不同種的細(xì)胞，產(chǎn)生不同的疚，參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過(guò)胎盤(pán)及粘膜：免疫球蛋白G(IgG)能通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒血流中，使胎兒形成自然被動(dòng)免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過(guò)消化道及呼吸道粘膜，是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性：抗體分子是一種蛋白質(zhì)，也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子，各具有不同的抗原性。
(6)抗體對(duì)理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同：不耐熱，60～70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì)，均能破壞抗體的作用?？贵w可被中性鹽類(lèi)沉淀。在生產(chǎn)上?？捎昧蛩徜@或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白，再經(jīng)透析法將其純化。
CD7/FITC  熒光素標(biāo)記抗CD7IgGBEND2蛋白三氟甲磺酸Mouse 5-LO (Arachidonate 5-Lipoxygenase) 檢測(cè)試劑盒

CD8/FITC  熒光素標(biāo)記CD8蛋白IgG骨涎蛋白三氟甲磺酸Mouse 12-LO (Arachidonate 12-Lipoxygenase) 檢測(cè)試劑盒

CD9/MRP-1/FITC  熒光素標(biāo)記CD9IgG副溶血性弧菌菌體鞭毛蛋白三氟甲磺酸Mouse 15-LO (Arachidonate 15-Lipoxygenase) 檢測(cè)試劑盒

CD10/CALLA/FITC  熒光素標(biāo)記CD10IgGBTBD6蛋白三氟甲磺酸Mouse /nNOS (Nitric Oxide Syhase 1, Neuronal) 檢測(cè)試劑盒

CD13/FITC  熒光素標(biāo)記氨肽酶NIgGBMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白7-溴-4-氟吲哚Mouse BFP (Brain Finger Protein) 檢測(cè)試劑盒  

CD14/FITC  熒光素標(biāo)記CD14蛋白IgG肝病NS5A反轉(zhuǎn)錄蛋白8(R)-(-)-1-{(S)-2-[Bis(3,5-di-trifluoromethylphenyl)phosphino]ferrocenyl}ethyldicyclohexylphosphine, min. 97%Mouse S100A8 (S100 Calcium Binding Protein A8) 檢測(cè)試劑盒

CD17/FITC  熒光素標(biāo)記CD17IgG骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切酶4-氟-7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑Mouse S100A9 (S100 Calcium Binding Protein A9) 檢測(cè)試劑盒

CD18/LFA-1/FITC  熒光素標(biāo)記白細(xì)胞粘附蛋白IgG骨形態(tài)發(fā)生蛋白94-氟-7-硝基-2,1,3-并氧雜惡二唑Mouse S100A10 (S100 Calcium-binding Protein A10) 檢測(cè)試劑盒

DPV/FITC  熒光素標(biāo)記抗鴨瘟病IgG細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白86-甲氧基吲哚Rat GAL1 (Galectin 1) 檢測(cè)試劑盒

DR3/F- AlphaR/TRAMP /FITC  熒光素標(biāo)記F-α膜受體/DR3 死亡受體3IgG硫酸軟骨素6-甲氧基吲哚Rat GAL2 (Galectin 2) 檢測(cè)試劑盒

DR4/APO2/TRAILR1 /FITC  熒光素標(biāo)記死亡受體4IgG上皮類(lèi)癌相關(guān)抗原6-甲氧基吲哚Rat GAL3 (Galectin 3) 檢測(cè)試劑盒

DR5/APO-2L/TRAILR2/CD262/FITC  熒光素標(biāo)記腫瘤細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5IgG磷酸化蛋白磷酸激酶PKC/CPI-177-甲氧基吲哚Rat GAL4 (Galectin 4) 檢測(cè)試劑盒

DRADA/ADAR1/FITC  熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶IgG著絲粒蛋白K7-甲氧基吲哚Rat GAL7 (Galectin 7) 檢測(cè)試劑盒

DRADA/ADAR1/FITC  熒光素標(biāo)記雙鏈RNA腺苷酸脫氨基酶（N端）IgG腫瘤/抗原1B4-氟鄰二甲酸酐Rat GAL8 (Galectin 8) 檢測(cè)試劑盒

DB/FITC  熒光素標(biāo)記肌Dystrobrevin β蛋白IgG轉(zhuǎn)鐵蛋白受體4-氟鄰二甲酸酐Rat GAL9 (Galectin 9) 檢測(cè)試劑盒

DBP1 /FITC  熒光素標(biāo)記精神分裂癥易感基因IgG8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框K294-氟鄰二甲酸酐Rat γGT1 (Gamma Glutamyltransferase 1) 檢測(cè)試劑盒
膜粘連蛋白6抗體Micromonospora│sp.分離基物: 爛葉土提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式株: no抗細(xì)；抗金黃色葡萄球；抗枯草芽孢桿培養(yǎng)基: CM0012生長(zhǎng)條件: 35-37C真空冷凍干燥

Micromonospora│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no抗恥垢分枝桿培養(yǎng)基: CM0027生長(zhǎng)條件: 28C-80℃冰箱凍結(jié)；真空冷凍干燥

Corynebacterium│tianjin提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no產(chǎn)谷氨酸。培養(yǎng)基: CM0389生長(zhǎng)條件: 28-30℃真空冷凍干燥法

pCas(#62225)模式株: 未知

安全等級(jí): 1模式株: no

Vibrio│alginolyticus分離基物: 水樣/上層海水提供形式: 斜面培養(yǎng)物模式株: no近海細(xì)培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Penicillium│auraiogriseum提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

Citricoccus│sp.分離基物: 水樣/海水提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no有機(jī)污染物降解/石油烴類(lèi)降解培養(yǎng)基: 471生長(zhǎng)條件: 4℃液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法

Streptomyces│sp.分離基物: 土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1模式株: no培養(yǎng)基: 0012生長(zhǎng)條件: 28℃液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法