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抗體的生活習(xí)性:
(1)結(jié)合特異性抗原:抗體與其他免疫球蛋白分子區(qū)別,就在于抗體能與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合,在體內(nèi)導(dǎo)致生理或病理效應(yīng);在體外產(chǎn)生各種直接或間接的可見的抗原抗體結(jié)合反應(yīng)??贵w是靠其分子上的特殊的結(jié)合部位與抗原結(jié)合的。
(2)激活補(bǔ)體:抗體與相應(yīng)抗原結(jié)合后,借助暴露的補(bǔ)體結(jié)合點去激活補(bǔ)體系統(tǒng)、激發(fā)補(bǔ)體的溶菌、溶細(xì)胞等免疫作用。
(3)結(jié)合細(xì)胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細(xì)胞,產(chǎn)生不同的疚,參與免疫應(yīng)答。
(4)可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進(jìn)入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)產(chǎn)品僅用于科研具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
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詳細(xì)介紹:
產(chǎn)品名稱 | 18號染色體開放閱讀框1抗體 |
英文名稱 | C18orf1 |
貨號 | BJ-K7923 |
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抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構(gòu)建載體并在大腸桿菌中進(jìn)行誘導(dǎo)表達(dá)獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進(jìn)行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進(jìn)一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進(jìn)行層析,具有高效,特異性強(qiáng),純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質(zhì)量、純度以及特異性。5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進(jìn)行保存??贵w一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。產(chǎn)品僅用于科研保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
MEE肉湯人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞破骨細(xì)胞mouse IgA 小鼠IgA
葡萄糖瓊脂人前列腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞腦動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞ACTH (Adrenorticotrophin hormons)(7-23) 促腎上腺皮質(zhì)激素(7-23)(抗原)
乳桿菌選擇性培養(yǎng)基(LBs瓊脂)人前列腺上皮細(xì)胞腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞Insulin (from porcine pancreas) 胰島素
馬鈴薯瓊脂人前列腺平滑肌細(xì)胞腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞Actin Alpha /Alpha-SMA (Actin alpha , smooth muscle aorta) 肌動蛋白(抗原)
酪胨-卵磷脂-吐溫20液體培養(yǎng)基基礎(chǔ)人前列腺成纖維細(xì)胞腦動脈血管平滑肌細(xì)胞rHBsAg 重組乙肝病毒表面抗原
腸球菌培養(yǎng)基基礎(chǔ)(疊氮鈉-結(jié)晶紫-七葉苷瓊脂)人顱骨成骨細(xì)胞腦膜細(xì)胞AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1) 脂肪細(xì)胞增強(qiáng)結(jié)合蛋白1
擬桿菌選擇性培養(yǎng)基基礎(chǔ)(改良GAM瓊脂基礎(chǔ))人股骨成骨細(xì)胞神經(jīng)元細(xì)胞Melamine/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記三聚氰胺
去氧膽酸鹽檸檬酸鹽瓊脂人軟骨細(xì)胞神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞SP-B peptide 肺表面活性蛋白B抗原
Ezrin/Radixin/FITC 熒光素標(biāo)記埃茲蛋白IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白615-硝基吲哚啉Rat FIL1d (Interleukin 1Delta) 檢測試劑盒
Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化埃茲蛋白IgG卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白83-氯-5-氟苯Rat FIL1h (Interleukin 1 Eta) 檢測試劑盒
Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化埃茲蛋白IgG神經(jīng)酰胺激酶CERK3-氯-5-氟苯Rat IL-1ra (Interleukin 1 Receptor Antagonist) 檢測試劑盒
Fabp2 /FITC 熒光素標(biāo)記脂肪酸結(jié)合蛋白2IgG細(xì)胞分裂周期樣激酶23,5-二(三氟甲基)苯甲Rat LCAT (Lecithin-Cholesterol Acyltransferase) 檢測試劑盒
FABP(brain)/FITC 熒光素標(biāo)記腦型脂肪酸結(jié)合蛋白IgG細(xì)胞分裂周期樣激酶33,5-二(三氟甲基)苯甲Rat ALD (Aldosterone) 檢測試劑盒
factor V/FITC 熒光素標(biāo)記凝血因子5IgG17號染色體開放閱讀框493,5-二(三氟甲基)苯甲Rat IL-2Rα (Interleukin-2 Receptor-α) 檢測試劑盒
factor VIII/FITC 熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原IgG17號染色體開放閱讀框53氧化釕(IV) 水合物Rat IL-3 (Interleukin 3) 檢測試劑盒
factor VIII/FITC 熒光素標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原IgG17號染色體開放閱讀框57氧化釕(IV) 水合物Rat FE (Ferritin) 檢測試劑盒
18號染色體開放閱讀框1抗體釀酒酵母Mouse GPC4 (Glypican 4) Kit 人高轉(zhuǎn)移肝癌細(xì)胞
鐮刀屬M(fèi)ouse GRN (Granulin) Kit大鼠腎足細(xì)胞
小平菇(秀珍菇)Mouse GCP-2 (Granulocyte Chemotactic Protein 2) Kit 人膜間皮細(xì)胞
枯草芽孢桿Mouse Gzms-A (granzyme A) Kit豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞
白地霉Mouse Gzms-B (granzyme B) Kit人胚胎眼Tenon's囊成纖維細(xì)胞
Mouse GREM1 (GremLin 1) Kit 人鼻粘膜上皮細(xì)胞
偶發(fā)貪銅Mouse GDF1 (Growth Differentiation Factor 1) Kit 人胚胎皮膚細(xì)胞
類干酪乳桿Mouse GDF2 (Growth Differentiation Factor 2) Kit 小鼠心房肌細(xì)胞
免疫熒光技術(shù)的實驗步驟:
一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。
2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地?fù)u晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標(biāo)本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。
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