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單克隆抗體:
1.概念:由單個B淋巴細胞進行無性繁殖形成的細胞系所產(chǎn)生出的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體。
2.特點:化學(xué)性質(zhì)單一,特異性強,靈敏度高。
3.單克隆抗體的應(yīng)用:
(1)診斷疾?。涸\斷病毒引起的疾病和用癌細胞抗原制備的單克隆抗體定位診斷。
(2)藥物導(dǎo)向治療:運用藥物與單克隆抗體連接在一起制成
(3)分離和純化抗原分子。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
肌鈣集蛋白/收鈣素抗體 | Calsequestrin | BJ-K8331 |
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抗體制備過程:
1.材料與試劑
a.提取的動物 Ig
b.弗氏*佐劑和弗氏不*佐劑
c.青霉素和鏈霉素
d.實驗動物 兔
e.其它材料及試劑
2、選擇實驗活體。
3、進行動物免疫實驗。
4、試取血樣進行測試,查看免疫效果。
5、如果免疫成功,殺死實驗活體,采集全部血清。
6、純化出抗體。
7、鑒定抗體。胎牛血清(無菌采制)
單抗的制備過程:
1.動物免疫:注射特定抗原蛋白
2.分離脾淋巴細胞:與培養(yǎng)好的骨髓瘤細胞混合,人工誘導(dǎo)細胞融合。
3.細胞融合:淋巴細胞雜交瘤的制備
4.雜交瘤細胞的篩選:HAT選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。(含次黃嘌呤(H)、氨基喋呤(A)及胸腺嘧啶核苷(T)的一種培養(yǎng)基,其中三種成分與細胞DNA合成有關(guān),骨髓瘤細胞遺傳缺陷型,不能利用,被淘汰)
5.培養(yǎng)雜交瘤細胞:體外培養(yǎng)雜交瘤細胞,從培養(yǎng)液中分離提取單克隆抗體?;蛘?,將雜交瘤細胞移植到小鼠腹腔內(nèi),從小鼠腹水中分離提取單克隆抗體。
6.單克隆抗體的制備和凍存、純化
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多克隆抗體定制:
當(dāng)機體受到抗原刺激后, 產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng),由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白,這就是免疫球蛋白,這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。 抗體的特異性取決于抗原分子的決定簇,各抗原分子具有許多抗原決定簇。因此,由它免疫動物所產(chǎn)生的抗血清實際上是多種抗體的混合物,稱為多克隆抗體。由于具有可識別多個表位、可引起凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)等優(yōu)點,產(chǎn)品僅用于科研被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)診斷領(lǐng)域,。
(1)IgG :血清中含量,因此是重要的抗感染分子,包括抗菌、抗病毒、抗毒素等。IgG 還能激活補體,結(jié)合并增強巨噬細胞的吞噬功能(調(diào)理作用和 ADCC 效應(yīng)),穿過胎盤,保護胎兒及新生嬰兒免受感染。
(2)IgA :分單體和雙體兩種。前者存在血清中,后者存在于黏膜表面及分泌液中,是黏膜局部抗感染的重要因素。
(3)IgM :是分子量大,體內(nèi)受感染后早產(chǎn)生的抗體,具有很強的激活補體和調(diào)理作用,因此是重要的抗感染因子,且常用于診斷早期感染。
(4)IgD :主要存在于成熟 B 細胞表面,是 B 細胞識別抗原的受體。
(5)IgE :血清中含量少的抗體,某些過敏性體質(zhì)的人血清中可檢測到,參與介導(dǎo) I 型超敏反應(yīng)和抗寄生蟲感染。
實驗原理 :
(1)特異性結(jié)合抗原:抗體本身不能直接溶解或殺傷帶有特異抗原的靶細胞,通常需要補體或吞噬細胞等共同發(fā)揮效應(yīng)以清除病原微生物或?qū)е虏±頁p傷。然而,抗體可通過與病毒或毒素的特異性結(jié)合,直接發(fā)揮中和病毒的作用。
(2)活補體:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通過經(jīng)典途徑激活補體,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通過替代途徑激活補體。
(3)結(jié)合細胞:不同類別的免疫球蛋白,可結(jié)合不同種的細胞,參與免疫應(yīng)答。
(4)產(chǎn)品僅用于科研可通過胎盤及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通過胎盤進入胎兒血流中,使胎兒形成自然被動免疫。免疫球蛋白A(IgA)可通過消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素。
(5)具有抗原性:抗體分子是一種蛋白質(zhì),也具有刺機體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的性能。不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性。
(6)抗體對理化因子的抵抗力與一般球蛋白相同:不耐熱,60~70℃即被破壞。各種酶及能使蛋白質(zhì)凝固變性的物質(zhì),均能破壞抗體的作用。抗體可被中性鹽類沉淀。在生產(chǎn)上常可用硫酸銨或硫酸鈉從免疫血清中沉淀出含有抗體的球蛋白,再經(jīng)透析法將其純化。
CCL23/MIP3 巨噬細胞炎性蛋白葡萄糖酸鋅1-(3-氯氧基)-4-氟Human MMP-13 (Matrix Metalloproteinase 13) 檢測試劑盒
CCL24/Eotaxin-2 嗜酸粒細胞趨化蛋白24曲安西龍2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋酸鹽Human sICAM-1/CD54 (Soluble Iercellular Adhesion Molecule 1) 檢測試劑盒
CCL19/MIP-3 beta 巨噬細胞炎性蛋白19雙氯芬酸鈉2,2-二氟-2-(氟磺酰)醋酸鹽Human CT (Calcitonin) 檢測試劑盒
CCL26/Eotaxin 3 嗜酸粒細胞趨化蛋白3舒林酸三(三基膦)羰基氫化銠(I)Human ACTH (Adrenocorticotropic Hormone) 檢測試劑盒
CCL27/CTACK 皮膚T細胞虜獲趨化因子替硝唑三(三基膦)羰基氫化銠(I)Human ACAT2 (Acetyl Coenzyme A Acetyltransferase 2, cytosolic) 檢測試劑盒
Dectin-1/CLECSF12 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A酮洛芬三(三基膦)羰基氫化銠(I)Human PRL (Prolactin) 檢測試劑盒
CCR-1 細胞表面趨化因子受體1硝地平三(三基膦)羰基氫化銠(I)Human MYO (Myoglobin) 檢測試劑盒
Dectin-2 C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A硝地平雜質(zhì)A鹽酸巴馬汀Human -T (Troponin T) 檢測試劑盒
銅轉(zhuǎn)運蛋白CUTC2-*基硅乙炔基噻吩Porcine PIGR/SC (Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Compone) 檢測試劑盒
CUTL1蛋白Tris-(2-cyanoethyl)phophinePorcine CNα1 (Catenin, Alpha 1) 檢測試劑盒
胱氨酸4-溴三氟甲Porcine ECFR (Eosinophil Chemotactic Factor Receptor) 檢測試劑盒
胰凝乳蛋白酶B4-溴三氟甲Porcine MEC/CCL28 (Mucosae Associated Epithelia Chemokine) 檢測試劑盒
補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白24-溴三氟甲Porcine LIFR (Leukemia Inhibitory Factor Receptor) 檢測試劑盒
細胞分化促進因子774-氟三氟甲Porcine CLC (Charcot Leyden Crystal Protein) 檢測試劑盒
半胱氨酸蛋白酶抑制劑樣蛋白14-氟三氟甲Porcine MAG (Myelin Associated Glycoprotein) 檢測試劑盒
CTBS蛋白氯二異基膦Porcine 11-DH-TXB2 (11-Dehydro-thromboxane B2) 檢測試劑盒
肌鈣集蛋白/收鈣素抗體鉤狀木霉Rat SOX2 (Sex Determining Region Y Box Protein 2) Kit
酮丁梭凍干粉 金黃色葡萄球(陽性)Rat SHBG (Sex Hormone-Binding Globulin) Kit
豌豆根瘤Rat STAT5B (Signal Transducer And Activator Of Transcription 5B) Kit
嗜熱毀絲霉Rat AC2 (Actinin Alpha 2) Kit
沖擊地土地桿Rat SLIT2 (Slit Homolog 2) Kit
提純禽型結(jié)核素Rat SNRPD1 (Small Nuclear Ribonucleoprotein D1) Kit
臘狀芽胞桿Rat sCD14 (Soluble Cluster of Differeiation 14) Kit
假單胞Rat SCD30L (Soluble Cluster of Differeiation 30 Ligand) Kit
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